[發明專利]一種核酸快速提取方法及其試劑盒

有效

• 申請號: 201810093348.8
• 申請日: 2018-01-30
• 公開（公告）號: CN108342382B
• 公開（公告）日: 2020-12-15
• 發明（設計）人: 侯月娥;伍建敏;李中圣
• 申請（專利權）人: 廣東海大畜牧獸醫研究院有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10;C12Q1/6806
• 代理公司: 廣州市越秀區哲力專利商標事務所(普通合伙) 44288
• 代理人: 羅晶;高淑怡

1.一種核酸快速提取方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)將樣品置入含有提取溶液的收集管，分散裂解均勻；

2)將吸附膜浸漬于提取溶液；所述吸附膜是經含有季銨鹽的陰離子樹脂處理后的纖維素膜；

3)使用洗滌緩沖液浸洗吸附膜，將吸附膜置于洗脫液或PCR反應液中釋放核酸；

步驟1)中，所述提取溶液由以下組分組成：Tris緩沖液、1M的異硫氰酸胍、0.5wt％TritonX100、1wt％Tween-20、60μg/mL的蛋白酶K；或

步驟1)中，加入研磨球進行分散；所述提取溶液由以下組分組成：Tris緩沖液、2M的異硫氰酸胍、150mM NaCl、10mM EDTA，1％Tween-20，0.5％SDS；

步驟1)中，所述Tris緩沖液的pH值為8.0；

所述洗滌緩沖液為含有0.1wt％Tween-20的Tris緩沖液。

2.如權利要求1所述的核酸快速提取方法，其特征在于，所述研磨球為鋼球。

3.如權利要求1所述的核酸快速提取方法，其特征在于，步驟3)中，在pH＝8.3的條件下釋放核酸。

4.一種快速核酸提取試劑盒，其特征在于，包括提取溶液、吸附膜、洗滌緩沖液和洗脫液，所述提取溶液由Tris緩沖液、1M的異硫氰酸胍、0.5wt％TritonX100，1wt％Tween-20，60μg/mL的蛋白酶K組成，所述提取溶液的pH值為8.0；所述吸附膜是經含有季銨鹽的陰離子樹脂處理后的纖維素膜；所述洗脫液或PCR反應液的pH值為8.3。

5.如權利要求4所述的快速核酸提取試劑盒，其特征在于，還包括研磨球，所述研磨球為鋼球。