[發明專利]用于定量檢測糖尿病自身抗體的試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 201810085130.8
• 申請日: 2018-01-29
• 公開（公告）號: CN108414766A
• 公開（公告）日: 2018-08-17
• 發明（設計）人: 孫玉龍;楊亞云;何林富;王義
• 申請（專利權）人: 上海良潤生物醫藥科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京同恒源知識產權代理有限公司 11275
• 代理人: 趙榮之

1.用于定量檢測糖尿病自身抗體的試劑在制備1型糖尿病輔助診斷或早期篩查的試劑盒中的應用，其特征在于：所述定量檢測糖尿病自身抗體的試劑包括偶聯有鏈霉親和素的磁性微粒、生物素化捕獲抗原，吖啶酯標記的檢測抗原和底物激發液，所述抗原選自鋅轉運體8抗原蛋白、谷氨酸脫羧酶抗原蛋白、酪氨酸磷酸酶抗原蛋白、胰島細胞抗原蛋白和胰島素抗原蛋白中的一種或幾種。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于：所述鋅轉運體8抗原蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述酪氨酸磷酸酶抗原蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述谷氨酸脫羧酶抗原蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述胰島細胞抗原蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示，胰島素抗原蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示。

3.一種用于定量檢測糖尿病自身抗體的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒包括偶聯有鏈霉親和素的磁性微粒、生物素化捕獲抗原，吖啶酯標記的檢測抗原和底物激發液，所述抗原選自鋅轉運體8抗原蛋白、谷氨酸脫羧酶抗原蛋白、酪氨酸磷酸酶抗原蛋白、胰島細胞抗原蛋白和胰島素抗原蛋白中的一種或幾種。

4.根據權利要求3所述一種用于定量檢測糖尿病自身抗體的試劑盒，其特征在于：所述底物激發液包括預激發液和激發液，所述與激發液各組分濃度如下：質量分數0.1％的過氧化氫，質量分數0.5％的Triton X-100，質量分數0.25％的DMF和濃度1mM的HCl；所述激發液各組分濃度如下：濃度0.5M的氫氧化鈉，質量分數的0.5％Triton X-100和質量分數0.25％的N，N-二甲基甲酰胺。

5.根據權利要求3所述一種用于定量檢測糖尿病自身抗體的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒還包括校準品，所述校準品為抗鋅轉運體8抗原蛋白單抗、抗谷氨酸脫羧酶抗原蛋白單抗、抗酪氨酸磷酸酶抗原蛋白單抗、抗胰島細胞抗原蛋白單抗、抗胰島素抗原蛋白單抗。

6.根據權利要求3所述一種用于定量檢測糖尿病自身抗體的試劑盒，其特征在于：所述磁性微粒的粒徑為0.3-2μm。

7.根據權利要求3所述一種用于定量檢測糖尿病自身抗體的試劑盒，其特征在于：所述的生物素化捕獲抗原用量均為100μL，生物素化鋅轉運體8抗原蛋白濃度為0.8-1.2μg/ml，生物素化谷氨酸脫羧酶抗原蛋白濃度為0.3-0.9μg/ml、生物素化酪氨酸磷酸酶抗原蛋白濃度0.3-0.7μg/ml、生物素化胰島細胞抗原蛋白濃度為0.4-1.2μg/ml和生物素化胰島素抗原蛋白濃度為0.5-1.5μg/ml。

8.根據權利要求3所述一種用于定量檢測糖尿病自身抗體的試劑盒，其特征在于：所述吖啶酯標記的檢測抗原用量為100μL，其中吖啶酯標記鋅轉運體8抗原蛋白濃度為0.5-1.5μg/ml、吖啶酯標記谷氨酸脫羧酶抗原蛋白濃度為2-4μg/ml、吖啶酯標記酪氨酸磷酸酶抗原蛋白濃度為1-3μg/ml、吖啶酯標記胰島細胞抗原蛋白濃度為2-4μg/ml、吖啶酯標記胰島素抗原蛋白濃度為2-6μg/ml。

9.根據權利要求3所述一種用于定量檢測糖尿病自身抗體的試劑盒，其特征在于：其特征在于：生物素化抗原和吖啶酯標記的檢測抗原保護液均為0.01mol/L、pH＝7.4的磷酸鹽緩沖液，所述的磷酸鹽緩沖液中含有質量分數2％的BSA和質量分數0.1％的硫柳汞。