[發明專利]一種基因載體及其用于治療青光眼的基因治療藥物

有效

• 申請號: 201810083850.0
• 申請日: 2018-01-29
• 公開（公告）號: CN108159434B
• 公開（公告）日: 2020-03-24
• 發明（設計）人: 孫曉東;羅學廷;翟元琦;劉洋
• 申請（專利權）人: 上海市第一人民醫院
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K38/17;A61P27/06
• 代理公司: 上海卓陽知識產權代理事務所(普通合伙) 31262
• 代理人: 巫蓓麗

本發明涉及一種基因治療載體，包含顯性抑制型(dominant negative)人類sterile apha and TIR motif?containing 1(dnSARM1)、啟動子、增加基因表達的β?globin內含子、human growth hormone poly(A)tail序列等。本發明還涉及包含上述基因治療載體的藥物及組合。其優點表現在：本發明的基因治療載體可用于治療或預防由青光眼引起的視網膜神經節細胞病變。

技術領域

本發明涉及基因工程技術領域，具體地說，是一種基因載體及其用于治療青光眼的基因治療藥物。

背景技術

青光眼(glaucoma)是一組以特征性視神經萎縮和視野缺損為共同特征的疾病，病理性眼壓增高是其主要危險因素。目前已經認識到，青光眼屬于一種神經變性性疾病，其病理特征是視網膜神經節細胞(retinal ganglion cell,RGC)的凋亡及其軸突的變性，以及伴隨而來的視功能進行性喪失。RGC負責向大腦輸出由視網膜捕捉到的視覺信號，由于高眼壓、多種遺傳因素或神經退行性病變等引起的RGC持續變性或凋亡，可導致視神經乳頭病變、視野缺失，進而發展為青光眼。

青光眼病理機制復雜，有遺傳和環境等因素參與，但其確切分子機制尚不明確。部分青光眼患者表現為高眼壓，在臨床可采取降眼壓等對癥治療手段，但在長期無法逆轉或延緩青光眼的發展。

有研究發現，在青光眼動物模型病理早期階段，視網膜出現代謝物煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD+)水平下降。NAD+是生化反應的重要介質，作為輔酶參與氧化還原反應，也可以作為底物參與分子信號傳遞。NAD+在細胞內合成與消耗之間的動態平衡將直接影響新陳代謝、生物晝夜節律，以及衰老等多種生物學過程。隨年齡增長，體內NAD+水平下降，伴隨線粒體結構和功能障礙，以NAD+作為輔底物的細胞信號傳遞酶活性受到影響，可能是NAD+失衡參與視網膜神經變性的主要機制。另有研究發現，通過補充NAD+或增強NAD+合成途徑能延緩RGC病變，從而明確NAD+水平是引起RGC病變的觸發因素。

近年研究發現，在神經系統中，SARM1是促進NAD+水平下降的關鍵分子，而在疾病模型中通過抑制SARM1活性能有效保持NAD+水平和延緩神經元變性。結合生物技術的發展，基于腺相關病毒(adeno-associatedvirus，AAV)載體的針對眼部疾病的基因治療方法受到廣泛關注，其安全性和有效性得到初步驗證和認可。

因此，本發明結合AAV技術，開發一種特異靶向RGC并表達SARM1(DN)的基因治療載體。

發明內容

本發明的第一個目的是，針對現有技術中的不足，提供一種基因載體。

本發明的第二個目的是，提供一種藥物組合物。

本發明的第三個目的是，提供一種基因載體的應用。

本發明的第四個目的是，提供一種治療青光眼的方法。

為實現上述第一個目的，本發明采取的技術方案是：一種腺相關病毒載體，所述的腺相關病毒載體含有增強子、特異性或非特異性啟動子、表達SARM1(DN)蛋白的基因序列，SARM1(DN)蛋白的序列如SEQ ID NO:2所示。

優選地，表達SARM1(DN)蛋白的基因序列選自與SEQ ID NO:1有至少96％、97％、98％、99％、100％同源性的核苷酸序列。

更優選地，所述的SARM1(DN)的基因序列含有SEQ ID NO:1。

最優選地，所述的SARM1(DN)蛋白的核苷酸序列選自SEQ ID NO:1。