[發明專利]軸前多指病的致病基因及其用途

有效

• 申請號: 201810076458.3
• 申請日: 2018-01-23
• 公開（公告）號: CN108251519B
• 公開（公告）日: 2019-06-28
• 發明（設計）人: 蘇培強;徐彩霞;周航;廖智恒;連成杰
• 申請（專利權）人: 中山大學附屬第一醫院
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/85;C12N15/90;C12N15/12;A01K67/027
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 宋靜娜;郝傳鑫

本發明提供了突變的LMBR1基因及其用途，包含突變的LMBR1基因的載體、宿主細胞以及試劑盒。此外，本發明還提供了用于診斷軸前多指病的診斷劑和試劑盒。本發明為PPD的診斷和治療提供了新的方法和工具。特別地，本發明所提供的診斷方法以及用于該方法的引物和/或探針和/或抗體可用于快速、有效地確定受試者是否患有PPD或處于發展PPD的風險中。

技術領域

本發明涉及分子遺傳學領域以及疾病診斷和治療領域；特別地，本發明提供了一種突變的軸前多指病相關的致病基因LMBR1及其用途，包含突變的LMBR1基因的載體、宿主細胞以及試劑盒。此外，本發明還提供了用于診斷軸前多指病的診斷劑和試劑盒。

背景技術

1996至2000年的研究報告顯示，我國多指(趾)畸形平均發生率約為0.1％，多指(趾)發生率在所有出生缺陷中排名第二，然而其多個亞型的致病基因及致病機制仍未闡明，因此，其遺傳成因與分子機制的研究具有重要的意義和價值，通過進一步明確其發病機制、定位病變靶點，能夠推動臨床PPD特異性診療技術的發展，并加深我們對于肢體發育機制的理解。

軸前多指/趾(Preaxial polydactyly，PPD)是常見先天性肢體畸形，分四種亞型，I型軸前多指(PPD-I)的致病基因及機制不明。先天性多指(趾)(polydactyly)是一種常見的肢體畸形，發生率居于各類肢體畸形之首，發病率約7～14‰[1]。軸前多指(趾)(preaxial polydactyly,PPD)作為先天性多指(趾)的主要亞型，以肢體橈(脛)側超出正常數目的手指(腳趾)贅生為主要臨床表現。

根據受累指(趾)發生的部位，目前軸前多指可劃分為4個亞型(I-IV)：I型(OMIM174400)：二指節拇指多指；II型(OMIM 174500)：三指節拇指多指；III型(OMIM 174600)：食指多指；IV型(OMIM 174700)：多指3并指。多指(趾)畸形除了獨立發生外，還可以作為一些綜合征的部分癥狀而伴隨出現，如交叉多指(趾)畸形(crossed polydactyly,OMIM175690)、三指節拇指多指綜合征(triphalangeal thumb-polysyndaetyly，TPT-PS，OMIM190605)等。

軸前多指(趾)多為常染色體顯性遺傳(autosomal dominant，AD)疾病，從簡單的三指節拇指單個指骨增加直至完整的額外指(趾)的產生，患病個體表型有明顯差異。Zguricas等通過對12個家系的臨床和遺傳研究，認為PPD的關鍵致病基因區域位于微衛星標記D7S55與D7S2423之間1.9cM的區域內；Heus等采用構建染色體7q36的物理和轉錄圖譜的方法，將候選區域進一步縮小至約450kb的區域，迄今報道的大部分PPD致病基因幾乎都定位于此。報道較為廣泛的多指相關基因有SHH、HLXB9、HOXD13、GLl3、LMBR1等，其中多數位于7號染色體尤其是7q36區域。對于PPD-II型，研究發現，所有報道的突變集中在位于7q36LMBR1(MIM*605522)基因五號內含子的ZRS(zone ofpolarizing activityregulatory sequence)區內，研究表明，在ZRS區，已有超過20個點突變，10個重復突變，1個三倍體與一個成對堿基的插入被報道與PPD-II型的發病相關GLI3基因的突變被證明與PPD-IV型有關，而SHH在肢芽前部的表達又受到諸如GLI3等轉錄因子的主動抑制，構成一種負反饋的調節機制。除此之外，PPD-II/III，TPT-PS，IV型并指(syndactyly type IV，SD4，MIM186200)及Werner Mesomelic綜合征(WMS，MIM 188770)等手指畸形都被報道與ZRS區的突變(mutation)或重復(duplication)相關。然而PPD-I型與PPD-III型的致病基因卻尚未被證實。但ZRS區作為一個多指畸形的遺傳熱點區域，一直引起國內外學者的密切關注。