[發(fā)明專利]快速鑒定中華鱉遺傳性別的PCR擴(kuò)增引物、方法及試劑盒

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810072956.0
• 申請(qǐng)日: 2018-01-25
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108048579A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-05-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 熊鋼;王曉清;周先文;鄧灶福;康驪;曾丹;王佩
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 湖南生物機(jī)電職業(yè)技術(shù)學(xué)院;湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/6888
• 分類號(hào): C12Q1/6888;C12N15/11;C12Q1/686
• 代理公司: 長(zhǎng)沙正奇專利事務(wù)所有限責(zé)任公司 43113
• 代理人: 何為;袁穎華

1.一種快速鑒定中華鱉遺傳性別的PCR擴(kuò)增引物，其特征在于，該引物序列如下:

正向引物：5’-AGGGCTTGGCTATGAGGGAA-3’，

反向引物：5’-TAAATTAGGACTGGAAGACACC-3’。

2.一種快速鑒定中華鱉遺傳性別的PCR方法，其特征在于，該方法是以待鑒定的中華鱉DNA為模板，利用權(quán)利要求1所述的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳檢測(cè)，當(dāng)擴(kuò)增產(chǎn)物出現(xiàn)973bp大小的條帶時(shí)，中華鱉個(gè)體的遺傳性別判定為雌性,即性染色體型為ZZ；當(dāng)擴(kuò)增產(chǎn)物出現(xiàn)1533bp大小的條帶和973bp大小的條帶，則中華鱉個(gè)體的遺傳性別判定為雄性,即性染色體型為ZW。

3.如權(quán)利要求2所述的快速鑒定中華鱉遺傳性別的PCR方法，其特征在于，所述PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系為：2μl中華鱉DNA模板、1μl 10nmol/L的正向引物、1μl 10nmol/L的反向引物、25μl 2×EasyTaq PCR SuperMix及21μl H2O。

4.如權(quán)利要求2所述的快速鑒定中華鱉遺傳性別的PCR方法，其特征在于，所述PCR擴(kuò)增條件為：94℃預(yù)變性5分鐘；94℃ 30秒，60℃ 30秒，72℃ 90秒，共32個(gè)循環(huán)；最后72℃延伸5分鐘。

5.一種快速鑒定中華鱉遺傳性別的試劑盒，其特征在于，該試劑盒包括權(quán)利要求1所述的引物。