[發明專利]稻米磷含量快速篩選方法

在審

• 申請號: 201810061630.8
• 申請日: 2018-01-23
• 公開（公告）號: CN108279232A
• 公開（公告）日: 2018-07-13
• 發明（設計）人: 石春海;鄭燦燦;徐世龍;金嘵麗
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N1/38;G01N1/28;G01N1/44;G01N1/30
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司 33212
• 代理人: 金祺

本發明公開了一種稻米磷含量快速篩選方法，包括以下步驟：對待測水稻糙米和標準品水稻糙米分別進行糙米糊化浸提、在糊化浸提所得物中加入4.52M H₂SO₄恒溫振蕩、加水稀釋后再加入乙酸?乙酸鈉緩沖液、搖勻后再加入鉬銻抗顯色劑；當待測水稻糙米反應液的顏色深于標準品水稻的糙米反應液顏色時，說明待測水稻糙米含磷量高于標準品水稻，顏色越深磷含量越高；當待測水稻糙米反應液的顏色淺于標準品水稻的糙米反應液顏色時，說明待測水稻糙米含磷量低于標準品水稻，顏色越淺磷含量越低。本發明為富磷水稻材料和單株的篩選提供一種快速、經濟、簡單、方便和有效的方法。

技術領域

本發明涉及水稻糙米含磷量的快速測定技術和篩選方法。

背景技術

谷類作物為人類正常的生長發育提供了其所必需的多種礦質元素。水稻作為我國的主要糧食作物之一，是人體必需營養元素的重要來源。磷存在于人體所有細胞中，是維持骨骼和牙齒的必要物質，幾乎參與所有生理上的化學反應；也是使心臟有規律跳動、維持腎臟正常機能和傳達神經刺激信息的重要物質。磷還是組成遺傳物質核酸的基本成分之一，而核苷酸是生命中傳遞信息和調控細胞代謝的重要物質——核糖核酸(RNA)和脫氧核糖核酸(DNA)的基本組成單位。

目前，稻米磷含量的測定方法主要有比色法、電感耦合等離子體發射光譜法、同位素法和陰離子交換樹脂法等。通過以上方法的測定均可得到稻米磷含量的準確數據，能真實反映出稻米中的磷含量；但上述方法需備有昂貴的精密儀器，且需采用繁瑣的樣品前處理程序，不能快速、方便地測定出稻米的磷含量，篩選效率低，也不適合于水稻育種過程中的大批量單株篩選。因此，對于缺少昂貴精密儀器的一些育種單位，開展富磷水稻的篩選工作會有一定的困難。另外，在雜交育種過程中，不同世代的單株會產生分離，育種工作者需要進行各代單株稻米磷含量的測定和篩選。在一般情況下，為盡快篩選出富磷的優良單株進行后續種植和再次篩選，前期篩選時一般只需要獲得相對準確的稻米磷含量、能夠分辨和確定高含磷量的單株就已可達到篩選目的，到后期水稻品系穩定成型后可再采用精密儀器進行精確測定。因此，研究和創建稻米磷含量的快速、簡便、高效測定方法和技術，在一定程度上可以促進稻米富含磷元素的功能性水稻新品種培育、推廣和應用，提高消費者的健康水平。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種稻米磷含量的簡易快速測定技術，為富磷水稻材料和單株的篩選提供一種快速、經濟、簡單、方便和有效的方法。

為了解決上述技術問題，本發明提供一種稻米磷含量快速篩選方法，包括以下步驟：

對待測水稻糙米和標準品水稻糙米分別進行如下步驟(1)～(4)：

(1)糙米糊化浸提：取水稻成熟糙米5粒，加入質量濃度為4％的NaOH溶液1.0±0.1ml，在65±5℃烘箱內糊化4.0±0.2h；

(2)在步驟(1)所得物中加入4.52M H₂SO₄溶液1.0±0.1ml，于50±5℃恒溫水浴振蕩器中震蕩30±5min，振蕩頻率為250±50r/min；

(3)將步驟(2)所得物中加蒸餾水稀釋至5ml，搖勻，得稀釋液；

取1ml稀釋液加入0.7～1.3ml(較佳為1ml)pH＝3.6的乙酸-乙酸鈉緩沖液，搖勻；

(4)在步驟(3)所得的溶液中加入0.30±0.05ml鉬銻抗顯色劑后加蒸餾水定容至5ml，搖勻后靜置30±5min；

(5)將步驟(4)所得待測水稻的糙米反應液和標準品水稻的糙米反應液進行顏色比較；

當待測水稻糙米反應液的顏色深于標準品水稻的糙米反應液顏色時，說明待測水稻糙米含磷量高于標準品水稻，顏色越深磷含量越高；