[發(fā)明專利]一種人的NADH脫氫酶突變蛋白及其應用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810047165.2 | 申請日： | 2018-01-18 |
| 公開（公告）號： | CN108359648A | 公開（公告）日： | 2018-08-03 |
| 發(fā)明（設計）人： | 張耀洲;吳玉乾;馮建華;李冬梅;張樹軍;胖鐵良;陳玉皎;王文雅 | 申請（專利權）人： | 天津市湖濱盤古基因科學發(fā)展有限公司 |
| 主分類號： | C12N9/02 | 分類號： | C12N9/02;C12N15/53;C07K16/40;C12Q1/6886;C40B40/08;G01N33/535;G01N33/574;G01N33/577 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 300300 天津*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 突變蛋白 白血病 單克隆抗體 人體白血病 診斷和治療 基因檢測 基因芯片 基因診斷 制備 應用 分析 研究 | ||
1.一種人的NADH脫氫酶突變蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.一種人的NADH脫氫酶突變蛋白的編碼基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ IDNO:2所示。
3.一種基因芯片，其特征在于，包括：固相載體和固定在該載體上的核苷酸探針；所述核苷酸探針根據(jù)所述人的NADH脫氫酶突變蛋白的核苷酸序列，與人的NADH脫氫酶正常蛋白的核苷酸序列的比對結果確定。
4.根據(jù)權利要求3所述的基因芯片，其特征在于，所述核苷酸探針為SEQ ID NO:3所示的堿基序列。
5.一種特異性識別人的NADH脫氫酶突變蛋白的單克隆抗體，其特征在于，其編碼的氨基酸序列為SEQ ID NO:1所示。
6.一種用于檢測人的NADH脫氫酶突變蛋白的抗體的ELISA試劑盒，其特征在于，所述ELISA試劑盒包括：包被有權利要求5所述單克隆抗體的ELISA酶標板、酶標二抗、檢測對象的NADH脫氫酶蛋白、樣品稀釋液、包被緩沖液、ELISA酶標板洗滌液、顯色液和終止液。
7.根據(jù)權利要求6所述用于檢測人的NADH脫氫酶突變蛋白的抗體的ELISA試劑盒，其特征在于，所述酶標二抗為稀釋的HRP辣根過氧化物酶標記的山羊抗人IgG。
8.一種基于權利要求6或7所述ELISA試劑盒檢測人的NADH脫氫酶突變蛋白的抗體的方法，其特征在于，包括：
a、使用所述包被緩沖液對權利要求5所述單克隆抗體進行稀釋，并將稀釋后的所述單克隆抗體加樣至ELISA酶標板的孔中，并室溫孵育；
b、使用所述樣品稀釋液將檢測對象的NADH脫氫酶蛋白稀釋成不同濃度梯度，并將不同濃度梯度的NADH脫氫酶蛋白分別加樣至ELISA酶標板的孔中，并室溫孵育；
c、甩去各孔中的液體，加入所述ELISA酶標板洗滌液，洗滌并甩干；
d、加入所述酶標二抗，并室溫孵育；
e、甩去各孔中的液體，加入所述ELISA酶標板洗滌液，洗滌并甩干；
f、加入所述顯色液，室溫避光孵育，加入所述終止液終止反應；
g、在酶標儀上測定波長為450nm處的吸光值。
9.根據(jù)權利要求8所述ELISA試劑盒檢測人的NADH脫氫酶突變蛋白的抗體的方法，其特征在于，進一步包括：空白對照實驗。
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