[發明專利]人體血清中地西泮與氯氮平檢測的在線固相萃取分析方法及系統

在審

• 申請號: 201810046611.8
• 申請日: 2018-01-18
• 公開（公告）號: CN108717083A
• 公開（公告）日: 2018-10-30
• 發明（設計）人: 尚嬋;丁利;賈繼明;王鵬;田蕊;鄒皓月
• 申請（專利權）人: 蘇州和合醫學檢驗有限公司;北京和合醫學診斷技術股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

人體血清中地西泮與氯氮平檢測的在線固相萃取分析方法及系統。本發明的目的是提供一種在線固相萃取技術與高效液相色譜耦合法，可同時測定人體血清中地西泮與氯氮平兩種藥物濃度。通過方法學驗證，表明該方法檢測準確，檢測速率快，提取回收率高，可重復性好。此外，本發明還提供了用于對人體血清中地西泮與氯氮平進行檢測的在線固相萃取分析系統。

技術領域

本本發明公開了一種采用在線固相萃取與高效液相色譜聯合應用技術，建立了同時測定人體血清中地西泮與氯氮平的分析方法，此外，本發明還提供了用于對人體血清中地西泮與氯氮平進行檢測的在線固相萃取分析系統。

背景技術

地西泮為苯二氮卓類長效藥物，具有抗焦慮、鎮靜催眠、抗驚厥、抗癲癇及促進中樞性肌肉松弛作用；氯氮平為目前公認的治療精神分裂癥最有效的抗精神病藥物，在臨床上廣泛用于失眠、抑郁癥、癲癇等神經系統疾病的控制。地西泮與氯氮平合用，常用來治療精神分裂癥。但由于患者精神異常，易因過量服藥導致中毒，危害患者的健康及生命安全，所以臨床上對其進行血藥濃度監控十分必要。經調研發現，目前國內尚未有采用高效液相色譜法同時測定地西泮與氯氮平兩種藥物的分析方法。

基于色譜技術的臨床檢驗工作，其面臨的首要挑戰就是生物樣本的制備。據統計，在生物樣本分析工作中，80%左右的工作量及研究經費用于樣本的前處理及分析樣本的制備，以獲得合格的、適用于現代分析儀器的檢測樣本。目前，生物樣本的前處理方法一般常用：沉淀蛋白法、液液萃取法及固相萃取法。然而，沉淀蛋白法及液液萃取法均存在試劑用量大，而且樣品損失率高的缺點。固相萃取法則存在成本消耗較高，樣品洗脫不均一等問題。

因此，急需建立一種可同時測定人體血清中地西泮與氯氮平兩種藥物的分析方法；并開發一種節約成本、提高樣品回收率的生物樣品前處理的新分析系統。

發明內容

本發明的目的旨在克服現有技術缺陷，利用在線固相萃取技術與高效液相色譜聯用方法，建立一種簡便、快捷、可同時測定人體血清中地西泮與氯氮平的分析方法。本發明在提高檢測效率的同時大大降低了血清中雜質對待測物的干擾，增加了色譜柱的使用壽命，改善了測定結果的準確度和重復性。

本發明的內容是通過以下技術方案來實現的：

一種人體血清中地西泮與氯氮平檢測的在線固相萃取分析系統，該系統包括兩部分，第一部分為：左泵、進樣器、六通閥和固相萃取柱；第二部分為：右泵、分析柱和檢測器；所述進樣器在系統中串聯于左泵的下游，所述檢測器在系統中串聯于分析柱的下游，所述六通閥用于切換該系統的兩種工作狀態；在第一種工作狀態下，固相萃取柱在系統中串聯于進樣器的下游，分析柱在系統中串聯于右泵的下游；在第二種工作狀態下，固相萃取柱在系統中串聯于右泵的下游，分析柱在系統中串聯于固相萃取柱的下游。

一種人體血清中地西泮與氯氮平檢測的在線固相萃取分析方法，所述方法包括將經過預處理的待測血清樣品進行在線固相萃取技術進行處理，再經分析柱分離與紫外檢測，獲得相關藥物的濃度，所述方法依次包括以下步驟：

采用乙酸乙酯萃取待測血清樣品，隨后進行氮吹，再用甲醇復溶，取上清液泵入在線固相萃取柱；

利用流動相A通過在線固相萃取柱進行雜質洗脫，將待測的地西泮與氯氮平保留于所述在線固相萃取柱上；

通過六通閥的切換，將所述在線固相萃取柱與分析柱在流路上進行串聯，利用流動相B進行洗脫，將在線固相萃取柱上保留的地西泮與氯氮平轉移到分析柱上進行成分分離；

采用分析色譜柱分離樣品中的成分，流出液進入紫外檢測器中進行分析。

3、如權利要求2中所述一種人體血清中地西泮與氯氮平檢測的在線固相萃取分析的方法，其特征在于，所述步驟在樣品進行氮氣吹干過程中，采用40～60℃進行加熱處理，促進溶劑的揮發。

進一步地，所述固相萃取柱采用Ph-1作為固定相；所述分析柱采用C18作為固定相。