[發(fā)明專利]一種可拋式雙酚A適配體生物傳感器的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810044511.1
• 申請日: 2018-01-17
• 公開（公告）號(hào): CN108226251B
• 公開（公告）日: 2020-01-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張慶;欒雅楠;李海玉;王婉;白樺
• 申請（專利權(quán)）人: 中國檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院
• 主分類號(hào): G01N27/327
• 分類號(hào): G01N27/327;G01N27/48
• 代理公司: 11416 北京律恒立業(yè)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙)
• 代理人: 裴大牛;顧珊

本發(fā)明公開了一種可拋式雙酚A適配體的生物傳感器的制備方法，包括如下步驟：清洗PET薄膜(1)并在其上濺射一層納米尺度的金膜(2)，裁剪成工作電極的尺寸，在所述金膜(2)上設(shè)置有透明膠帶(3)，在所述透明膠帶(3)上設(shè)置有圓形的通孔(4)，所述通孔(4)所在的區(qū)域?yàn)殡姌O區(qū)，所述透明膠帶(3)覆蓋的區(qū)域?yàn)榻^緣區(qū)，其余區(qū)域?yàn)閷?dǎo)線區(qū)；對所述電極區(qū)的表面進(jìn)行雙酚A適配體修飾，得到雙酚A適配體修飾的金納米粒子電極，采用MCH溶液對所述電極區(qū)的表面進(jìn)行鈍化，采用亞甲基藍(lán)(MB)滴涂在所述電極區(qū)的表面，得到修飾后的工作電極。本發(fā)明的可拋式雙酚A適配體的生物傳感器具有操作簡單、分析速度快、成本低、適用于現(xiàn)場檢測等優(yōu)勢。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種生物傳感器，特別是涉及一種基于發(fā)卡狀適配體和亞甲基藍(lán)復(fù)合物的可拋式雙酚A適配體的生物傳感器的制備方法。

背景技術(shù)

雙酚A(Bisphenol A，簡稱BPA)，化學(xué)名稱為2,2-二(4-羥基苯基)丙烷，屬于低毒性化學(xué)物質(zhì)，作為一種十分重要的塑化劑材料，常用于玩具、奶瓶、飲水杯、食品包裝材料等產(chǎn)品的生產(chǎn)中。其結(jié)構(gòu)類似雄二醇和乙烯雌酚，因而具有和其他環(huán)境激素類似的效應(yīng)，發(fā)揮擬雌激素作用，干擾生物體生殖、生長發(fā)育、神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)等，甚至誘發(fā)癌癥。世界各國都紛紛出臺(tái)了相應(yīng)的法律法規(guī)來禁止雙酚A的應(yīng)用。如2010年5月，法國國民議會(huì)議員投票一致贊成禁止對3歲以下兒童使用的食品容器使用雙酚A的禁令。最新歐盟指令限制雙酚A在玩具中的遷移量應(yīng)小于0.04mg/L。因此，建立一種可以對痕量雙酚A快速檢測的簡便方法具有重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種結(jié)構(gòu)簡單、成本低、操作簡便的可拋式雙酚A適配體的生物傳感器的制備方法。

一種可拋式雙酚A適配體的生物傳感器的制備方法，包括如下步驟：

步驟一、清洗PET薄膜，并在其上濺射一層納米尺度的金膜；

步驟二、將濺射好的所述PET薄膜取出，裁剪成工作電極的尺寸；

步驟三、在所述金膜上設(shè)置有透明膠帶，在所述透明膠帶上設(shè)置有圓形的通孔，所述通孔所在的區(qū)域?yàn)殡姌O區(qū)，所述透明膠帶覆蓋的區(qū)域?yàn)榻^緣區(qū)，其余區(qū)域?yàn)閷?dǎo)線區(qū)；

步驟四、對所述電極區(qū)的表面進(jìn)行雙酚A適配體修飾，得到雙酚A適配體修飾的金納米粒子電極；

步驟五、采用MCH溶液對所述電極區(qū)的表面進(jìn)行鈍化；

步驟六、采用MB滴涂在所述電極區(qū)的表面，對電極表面進(jìn)行信號(hào)分子的組裝，得到修飾后的工作電極。

本發(fā)明所述的可拋式雙酚A適配體的生物傳感器的制備方法，其中，所述金膜采用高真空離子濺射儀濺射，濺射時(shí)間為80s-100s，濺射電流為20-30mA，濺射真空度不低于6×10^-3mbar，靶材距樣品臺(tái)的距離為9cm，濺射后的所述金膜的厚度為16-20nm。

本發(fā)明所述的可拋式雙酚A適配體的生物傳感器的制備方法，其中，所述雙酚A適配體的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示，步驟四具體包括如下方法：將含有0.05μMTCEP的濃度為1μM的雙酚A適配體溶液100μL滴涂在所述電極區(qū)的表面，放置于4℃的冰箱內(nèi)12h，用去離子水沖洗所述電極區(qū)的表面，氮?dú)獯蹈伞?/p>

本發(fā)明所述的可拋式雙酚A適配體的生物傳感器的制備方法，其中，步驟五具體包括如下步驟：取100μL濃度為1mM的MCH滴涂于所述電極區(qū)的表面，在室溫下靜置2h后用去離子水沖洗，氮?dú)獯蹈伞?/p>

本發(fā)明所述的可拋式雙酚A適配體的生物傳感器的制備方法，其中，步驟六具體包括如下步驟：將0.1mM的MB滴涂在所述電極區(qū)的表面，室溫下靜置2h，去離子水沖洗并氮?dú)獯蹈桑玫叫揎椇蟮墓ぷ麟姌O。