[發(fā)明專利]一種β-葡萄糖苷酶偶聯(lián)磁性納米粒子的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810034473.1
• 申請(qǐng)日: 2018-01-15
• 公開（公告）號(hào): CN108273069B
• 公開（公告）日: 2023-09-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周潔
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 湖北省中醫(yī)院
• 主分類號(hào): A61K47/64
• 分類號(hào): A61K47/64;A61K47/69;A61P35/00
• 代理公司: 北京天盾知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11421
• 代理人: 黃淑娟

本發(fā)明屬于納米靶向藥物制備領(lǐng)域，具體涉及一種β?葡萄糖苷酶偶聯(lián)磁性納米粒子的制備方法。本發(fā)明提供的一種β?葡萄糖苷酶偶聯(lián)磁性納米粒子的制備方法，包括以下步驟：S1：淀粉包裹的磁性納米粒子上葡萄糖環(huán)的羥基被高碘酸鈉部分氧化生成活性醛基基團(tuán)的步驟；S2：S1中活性醛基基團(tuán)與β?葡萄糖苷酶分子的氨基反應(yīng)形成Schiff氏堿，得到β?葡萄糖苷酶偶聯(lián)磁性納米粒子的步驟。本發(fā)明提供一種β?葡萄糖苷酶偶聯(lián)磁性納米粒子的制備方法，由該方法制備的β?葡萄糖苷酶磁性納米粒子粒徑小、載酶效率高，能實(shí)現(xiàn)靶向腫瘤部位的最大酶活性和最大程度的腫瘤抑制。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于納米靶向藥物制備領(lǐng)域，具體涉及一種β-葡萄糖苷酶偶聯(lián)磁性納米粒子的制備方法。

背景技術(shù)

目前靶向藥物方法有抗體靶向藥物、受體靶向藥物、基因靶向藥物等，然而，由于許多限制，目前的靶向酶解前藥策略體內(nèi)很難取得成功，其主要原因包括：所傳送酶活性喪失，腫瘤特異性抗原的缺失，傳送效率低下，載體免疫原性監(jiān)測(cè)困難，難以控制吞噬作用和藥代動(dòng)力學(xué)特征。

即便采用載酶粒子攜帶酶進(jìn)行腫瘤部位傳送，但也存在制備的偶聯(lián)酶粒子粒徑偏大，在腫瘤部位聚集困難的缺點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對(duì)上述問題，提供一種β-葡萄糖苷酶偶聯(lián)磁性納米粒子的制備方法，由該方法制備的β-葡萄糖苷酶偶聯(lián)磁性納米粒子粒徑小、載酶效率高，能實(shí)現(xiàn)靶向腫瘤部位的最大酶活性和最大程度的腫瘤抑制。

本發(fā)明提供的一種β-葡萄糖苷酶偶聯(lián)磁性納米粒子的制備方法，包括以下步驟：

S1：淀粉包裹的磁性納米粒子上葡萄糖環(huán)的羥基被高碘酸鈉部分氧化生成活性醛基基團(tuán)的步驟；

S2：S1中活性醛基基團(tuán)與β-葡萄糖苷酶分子的氨基反應(yīng)形成Schiff氏堿，得到β-葡萄糖苷酶偶聯(lián)磁性納米粒子的步驟。

作為本發(fā)明的進(jìn)一步優(yōu)化，還包括步驟S3，如下：

S3：S2中載β-葡萄糖苷酶偶聯(lián)磁性納米粒子中的酰胺鍵被硼氫化鈉還原成仲胺的步驟。

本發(fā)明還提供由上述制備方法制得的一種β-葡萄糖苷酶偶聯(lián)磁性納米粒子。

本發(fā)明提供一種β-葡萄糖苷酶偶聯(lián)磁性納米粒子的制備方法，由該方法制備的β-葡萄糖苷酶磁性納米粒子粒徑小、載酶效率高，能實(shí)現(xiàn)靶向腫瘤部位的最大酶活性和最大程度的腫瘤抑制。

附圖說明

圖1是本發(fā)明一種β-葡萄糖苷酶偶聯(lián)磁性納米粒子的制備方法流程圖；

圖2是圖1所示制備過程中MNP的水溶性粒徑和電勢(shì)特征表；

圖3是圖1所示載酶磁性納米粒子紅外光譜圖；

圖4是圖1所示D-MNP的投射電鏡明場(chǎng)圖像；

圖5是圖1所示載酶磁性納米粒子的投射電鏡明場(chǎng)圖像；

圖6是圖1所示高碘酸鈉濃度對(duì)β-Glu-MNP酶活性的影響圖；

圖7是圖1所示固定化的和單純的β-葡萄糖苷酶對(duì)于苦杏仁苷殺傷前列腺癌細(xì)胞的影像圖。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作詳細(xì)說明。

實(shí)施例1

如圖1所示，本實(shí)施例包括以下步驟：

S1：淀粉包裹的磁性納米粒子(Magnetic?Nano?Particle)上葡萄糖環(huán)的羥基被高碘酸鈉部分氧化生成活性醛基基團(tuán)的步驟；

S2：S1中活性醛基基團(tuán)與β-葡萄糖苷酶分子(β-Glu)的氨基反應(yīng)形成Schiff氏堿，得到β-葡萄糖苷酶偶聯(lián)磁性納米粒子(β-Glu-MNP)的步驟。