[發明專利]一種g-C3N4@Hemin復合物模擬酶的制備與應用

在審

• 申請號: 201810020288.7
• 申請日: 2018-01-09
• 公開（公告）號: CN108273554A
• 公開（公告）日: 2018-07-13
• 發明（設計）人: 傅強;王燕;劉瑞林;余佩;王璐;陳國寧;舒花;常春
• 申請（專利權）人: 西安交通大學
• 主分類號: B01J31/22
• 分類號: B01J31/22;G01N21/78
• 代理公司: 西安智大知識產權代理事務所 61215
• 代理人: 賀建斌

1.一種g-C₃N₄@Hemin復合物模擬酶的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

取三聚氰胺粉末放于磁舟中，置于馬弗爐于氮氣中550℃加熱裂解4-6h后自然冷卻至室溫，得到淡黃色g-C₃N₄粉末；取g-C₃N₄粉末分散于去離子水中使其濃度為50mg/mL-100mg/mL，超聲分散16h，以11000rpm的轉速離心5min以除去殘留的未剝離的g-C₃N₄，將含有g-C₃N₄納米片的上清液在60℃下烘干備用；

取已烘干的g-C₃N₄納米片分散于去離子水中使其濃度為2mg/mL,取血紅素分散于去離子水中使其濃度為1mg/mL-5mg/mL，將兩溶液按照體積之比1:1混合，于水浴中65℃恒溫反應8-10h，自然冷卻至室溫后，得到混合溶液；將混合溶液在11000rpm下離心，采用無水乙醇和蒸餾水洗滌3-5次，所得沉積物于60℃下烘干，即得g-C₃N₄@Hemin復合物。

2.根據權利要求1所述的一種g-C₃N₄@Hemin復合物模擬酶的制備方法，其特征在于：所述的g-C₃N₄@Hemin復合物具有過氧化物酶樣催化活性，最適pH值為4.0，最適溫度值為40℃。

3.利用權利要求1所述的g-C₃N₄@Hemin復合物模擬酶比色檢測過氧化氫，其特征在于，包括以下步驟：

配置一系列濃度為5μmol/L-500μmol/L的過氧化氫水溶液，向離心管中加入100μL濃度為2μmol/LTMB溶液，然后加入上述不同濃度的過氧化氫水溶液，再加入100μL濃度為50μg/mL的g-C₃N₄@Hemin復合物模擬酶分散液，最后向上述溶液中加入pH4.0濃度為0.2mmol/L的HAc-NaAc緩沖液至溶液總體積為3mL，于40℃水浴條件下恒溫反應10min后滴加20μLH₂SO₄終止反應，H₂SO₄的體積濃度為20％，通過紫外-可見光譜檢測其在652nm處的吸光度，再根據吸光度對過氧化氫濃度作圖。

4.利用權利要求1所述的g-C₃N₄@Hemin復合物模擬酶比色檢測葡萄糖，其特征在于，包括以下步驟：

首先向離心管中加入1mL的pH7.4濃度為0.2mmol/L的磷酸鹽緩沖溶液，再分別加入100μL的10μmol/L-500μmol/L不同濃度的葡萄糖溶液，然后加入10μL濃度為5mg/mL的葡萄糖氧化酶，搖勻，在37℃水域條件下反應1h，得混合液；向離心管中加入100μL濃度為2μmol/L的TMB溶液，再加入100μL濃度為0.5mg/mL的g-C₃N₄@Hemin復合物模擬酶分散液，最后向上述溶液中加入pH4.0，濃度為0.2mmol/L的HAc-NaAc緩沖液至溶液總體積為3mL，于40℃水浴條件下恒溫反應10min后滴加20μLH₂SO₄終止反應，H₂SO₄的體積濃度為20％，通過紫外-可見光譜檢測其在652nm處的吸光度，再根據吸光度對葡萄糖濃度作圖。

5.利用權利要求1所述的g-C₃N₄@Hemin復合物模擬酶用于血清中葡萄糖的檢測，其特征在于，包括以下步驟：

先向離心管中加入1mL的pH7.4濃度為0.2mmol/L的磷酸鹽緩沖溶液，再加入100μL稀釋過的血清溶液，稀釋過的血清溶液為血清用去離子水稀釋十倍后的溶液，然后加入10μL濃度為5mg/mL的葡萄糖氧化酶，在37℃水浴條件下反應1h，得混合液；向離心管中加入100μL濃度為2μmol/L的TMB溶液，再加入100μL濃度為0.5mg/mL的g-C₃N₄@Hemin復合物模擬酶分散液，最后向上述溶液中加入pH4.0，濃度為0.2mmol/LHAc-NaAc緩沖液至溶液總體積為3mL，于40℃水浴條件下恒溫反應10min后滴加20μLH₂SO₄終止反應，H₂SO₄的體積濃度為20％，通過紫外-可見光譜檢測其在652nm處的吸光度，將得到的吸光度值代入葡萄糖標準曲線中，確定血清中葡萄糖的含量。