[發(fā)明專利]一種桑椹蛋白多糖、其制備方法及用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810016008.5
• 申請(qǐng)日: 2018-01-08
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110016084B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-05-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 丁侃;李賽娟;廖文鋒
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所
• 主分類號(hào): C08B37/00
• 分類號(hào): C08B37/00;A61K38/16;A61P25/28
• 代理公司: 北京金信知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11225
• 代理人: 劉鋒;李琳

1.一種蛋白多糖FMP-6-S4，其特征在于，包含重量百分含量為78％～82％的多糖和重量百分含量為18％～22％的蛋白；所述的多糖的組成為半乳糖醛酸，半乳糖，阿拉伯糖，鼠李糖和葡萄糖；其中，所述的多糖的結(jié)構(gòu)單元是以1→4連接的α-D-吡喃半乳糖醛酸、1→2連接的α-L-吡喃鼠李糖為主鏈，而在α-D-吡喃半乳糖醛酸的C-3位上被α-L-吡喃己烯糖醛酸和β-D-吡喃半乳糖醛酸取代，在α-L-吡喃鼠李糖的C-4位上被α-L-呋喃阿拉伯糖、1,5-α-L-呋喃阿拉伯糖、β-D-吡喃半乳糖或β-D-吡喃葡萄糖、1,6-β-D-吡喃葡萄糖殘基取代。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白多糖FMP-6-S4，其特征在于，所述的多糖具有如結(jié)構(gòu)式I所示的結(jié)構(gòu)單元：

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白多糖FMP-6-S4，其特征在于，所述的蛋白多糖FMP-6-S4的重均分子量的范圍為3-120kDa。

4.一種制備權(quán)利要求1所述的蛋白多糖FMP-6-S4的方法，其特征在于，所述的方法包括以下步驟：

a.蛋白多糖提取：

干燥的桑椹，粉碎，酶聯(lián)水提，滅酶，離心，將所得濾液濃縮，透析、濃縮、離心、醇沉、離心、洗滌、干燥，得酶聯(lián)水提桑椹粗蛋白多糖；

b.蛋白多糖純化：

b1.取步驟a制備的桑椹粗蛋白多糖，水溶解，離心，上清液經(jīng)陰離交換柱進(jìn)行初步分級(jí)純化，依次以水和0.05～0.3M的NaCl溶液洗脫，收集0.2M NaCl溶液的洗脫組分，得蛋白多糖FMP-6；

b2.將步驟b1制備的蛋白多糖FMP-6溶于0.01～1倍重量的0.2M NaCl溶液中，離心，上清液經(jīng)凝膠色譜柱分離，收集合并蛋白多糖FMP-6-S4這一組分，濃縮，透析，冷凍干燥，得所述蛋白多糖FMP-6-S4。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，

所述步驟a包括：干燥的桑椹經(jīng)粉碎機(jī)粉碎，加入15～20倍重量的水，于50～55℃下，分別加入桑椹重量的2～3％纖維素酶、桑椹重量的1～3％淀粉酶及桑椹重量的0.5～2％木瓜蛋白酶提取1～3h后，將溫度升至100℃以上使酶失活，離心，濾液濃縮，透析，再濃縮，離心后，加入五倍～十倍于上清液體積的乙醇，離心得沉淀，沉淀經(jīng)有機(jī)溶劑無(wú)水乙醇與丙酮洗滌三～六次，經(jīng)真空干燥得酶聯(lián)水提桑椹粗蛋白多糖，

所述步驟b包括：b1.取桑椹粗蛋白多糖，加入10～20倍重量的水中溶解，離心，上清液經(jīng)陰離交換柱分離，依次以去離子水、0.05M、0.1M、0.2M及0.3M NaCl溶液洗脫，硫酸-苯酚檢測(cè)，收集合并0.2M NaCl溶液的洗脫液，濃縮，離心，取上清液透析，冷凍干燥，得初步純化的蛋白多糖FMP-6；

b2.將步驟b1制備的蛋白多糖FMP-6溶于0.01～1倍重量的0.2M NaCl溶液中，離心，上清液經(jīng)凝膠色譜柱分離，收集合并蛋白多糖FMP-6-S4這一組分，濃縮，透析，冷凍干燥，得所述蛋白多糖FMP-6-S4。