[發(fā)明專利]一株植物乳桿菌、該植物乳桿菌凍干粉及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810015431.3
• 申請日: 2018-01-08
• 公開（公告）號: CN107937320B
• 公開（公告）日: 2021-03-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 姚國強;張建軍
• 申請（專利權(quán)）人: 金華銀河生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/04;C12R1/25
• 代理公司: 北京弘權(quán)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11363
• 代理人: 逯長明;許偉群

本申請?zhí)峁┮恢曛参锶闂U菌(Lactobacillus plantarum LP4)，其微生物保藏編號為CGMCC No.14533。本申請還提供一種制備所述植物乳桿菌LP4凍干粉的方法及使用該方法制備的植物乳桿菌LP4凍干粉，所述方法在對所述植物乳桿菌LP4進行凍干前對所述植物乳桿菌LP4進行包被處理，組合使用多種保護劑，特別地，在對所述植物乳桿菌LP4表面進行首次包被后，再進行二次包被，從而彌補首次包被可能存在的包被不完全的缺陷，在所述植物乳桿菌LP4菌體表面形成至少完全的致密的保護層，并與所述菌體構(gòu)成微囊結(jié)構(gòu)，從而有效地將所述植物乳桿菌LP4菌體與外界環(huán)境隔離，并在微囊內(nèi)部形成穩(wěn)定地內(nèi)環(huán)境，從而使得所述植物乳桿菌LP4在常溫條件下也能夠保持活力。

技術(shù)領(lǐng)域

本申請涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一株植物乳桿菌、該植物乳桿菌凍干粉及其制備方法。

背景技術(shù)

相比于乳酸菌深冷制劑，乳酸菌凍干粉由于具有便于貯藏和使用等優(yōu)點被廣泛使用。乳酸菌凍干粉中菌體的活菌數(shù)、存活率、活力等穩(wěn)定性指標對其能否正常使用具有重要影響。

通常，乳酸菌凍干的方法為將含有液相組分的乳酸菌菌體在低溫環(huán)境下急速冷凍，再按照程序升溫獲得乳酸菌凍干粉，這種方法在凍干過程中，菌體細胞由于遭遇冷凍沖擊會導致細胞壁通透性改變和代謝損傷，從而造成菌體失活。在貯存期間，乳酸菌凍干粉中乳酸菌菌體則會因為與環(huán)境中水、氧和自由基接觸造成損傷，進一步造成菌體失活。由于凍干過程和貯藏期間的雙重損失，從而導致在實際使用時乳酸菌凍干粉中活菌數(shù)量低，存活率低，菌體活力不足等問題。

現(xiàn)有技術(shù)有大量研究來減少在凍干過程中乳酸菌活菌的損失，相比于直接進行凍干的方法，通過這些方法制備的凍干粉中活菌數(shù)量有所提高，但是，這些方法并不能解決貯藏階段活菌的損失，制得的乳酸菌凍干粉仍需低溫保藏，通過使乳酸菌休眠的方法來保持乳酸菌的活性。而在沒有低溫保藏設(shè)備的條件下，乳酸菌凍干粉則被置于常溫環(huán)境中，從而導致乳酸菌凍干粉中的活菌存活率會急劇下降，表現(xiàn)為乳酸菌凍干粉失效，進而影響其功效，這為乳酸菌凍干粉的使用帶來了極大的不便。

發(fā)明內(nèi)容

本申請的目的之一是提供一株植物乳桿菌，本申請的目的之二是提供一種將所述植物乳桿菌制備成凍干粉的方法，以解決現(xiàn)有凍干方法制得的乳酸菌凍干粉中活菌數(shù)量低及常溫貯藏菌體易失活，貨架期內(nèi)無法有效保證活菌數(shù)的問題。

為達到上述目的，本申請通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)：

植物乳桿菌LP4(Lactobacillus plantarum LP4)通過以下方法篩選得到：

所述植物乳桿菌LP4(Lactobacillus plantarum LP4)是從傳統(tǒng)泡菜中分離得到的潛在益生特性的益生菌；該菌株已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物菌種保藏中心，保藏號：CGMCC No.14533；分類命名為：植物乳桿菌(Lactobacillusplantarum LP4)；保藏時間：2017年8月18日；保藏地址：中國北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所。

本申請所分離的植物乳桿菌LP4(Lactobacillus plantarum LP4)具有如下生物學特性：菌種為革蘭氏陽性菌，呈直桿狀，單個、有時成對或成鏈狀。MRS固體培養(yǎng)基上菌落直徑1-3mm，乳白色，凸起，呈圓形，表面光滑。最適生長溫度為30～37℃，厭氧或兼性厭氧，最適pH＝6.5左右，在MRS液體培養(yǎng)基中生長渾濁。

本申請?zhí)峁┮环N制備所述植物乳桿菌LP4(Lactobacillus plantarum LP4)凍干粉的方法，包括：

步驟1-1，將濕菌體與抗氧化劑混合，攪拌；

步驟1-2，將步驟1-1制得的體系與多元醇混合，攪拌；

步驟1-3，將步驟1-2制得的體系與堿性多糖或其水分散體系混合，攪拌；