[發明專利]一種抗漂白單分子定位三維超分辨顯微系統

有效

• 申請號: 201810014176.0
• 申請日: 2018-01-08
• 公開（公告）號: CN107941777B
• 公開（公告）日: 2020-10-02
• 發明（設計）人: 李旸暉;周輝;李雨雪;劉小煜;夏成樑
• 申請（專利權）人: 中國計量大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 杭州之江專利事務所(普通合伙) 33216
• 代理人: 黃燕

1.一種抗漂白單分子定位三維超分辨顯微系統，其特征在于，包括第一激光器、擴束準直單元、相位光柵、第三透鏡、第一二色鏡、物鏡、可正對物鏡往復移動的樣品臺、濾光片、第四透鏡、探測器、第二二色鏡、第二激光器；

所述第一激光器出射的激光經過擴束準直單元擴束準直后，傾斜入射到相位光柵表面，并被相位光柵反射后照射至第二二色鏡；

所述第二激光器出射的激光被第二二色鏡反射后，與來自第一激光器、并經第二二色鏡透射的激光合束，再經過第三透鏡、第一二色鏡后被聚焦在物鏡的后焦平面處，最后寬場照明樣品臺上的整個樣品，激活樣品內部分的熒光標記；

所述第一激光器出射的激光從物鏡出射后將在物鏡的焦平面處產生時域聚焦，激發樣品臺上處于時域聚焦平面的已被第二激光器激活的樣品的熒光；

所述樣品中被激發的熒光沿激光傳播相反的方向傳輸，重新進入物鏡，然后被第一二色鏡反射后，再依次通過濾光片、第四透鏡，最后被探測器接收并成像；

所述第一激光器為飛秒激光器；所述第二激光器為連續光激光器。

2.根據權利要求1所述的抗漂白單分子定位三維超分辨顯微系統，其特征在于，所述擴束準直單元包括同軸設置的第一透鏡和第二透鏡，第一透鏡和第二透鏡共焦放置，第一透鏡靠近第一激光器設置，且第一透鏡焦距小于第二透鏡。

3.根據權利要求1所述的抗漂白單分子定位三維超分辨顯微系統，其特征在于，所述第一激光器為鈦藍寶石飛秒激光器，最終輸出峰值波長為830納米，光譜帶寬為10納米，脈沖寬度小于100飛秒，輸出平均功率為1.5瓦。

4.根據權利要求1所述的抗漂白單分子定位三維超分辨顯微系統，其特征在于，所述第二激光器為連續光半導體激光器，輸出波長為405納米。

5.根據權利要求1所述的抗漂白單分子定位三維超分辨顯微系統，其特征在于，擴束準直后的激光以26.44°入射到相位光柵的表面。

6.根據權利要求4所述的抗漂白單分子定位三維超分辨顯微系統，其特征在于，所述第二二色鏡對于405納米激光具有高反射率，對于825至835納米激光具有高透射率。

7.根據權利要求1所述的抗漂白單分子定位三維超分辨顯微系統，其特征在于，所述第一二色鏡、第二二色鏡均傾斜45°放置。

8.根據權利要求6所述的抗漂白單分子定位三維超分辨顯微系統，其特征在于，第一二色鏡包括兩個透射帶：分別為825納米至835納米以及400至410納米；同時，第一二色鏡反射500納米至600納米的光，反射率95%。