[發明專利]一種培養五棱散尾鬼筆的培養基及其制備方法

在審

• 申請號: 201810009184.6
• 申請日: 2018-01-05
• 公開（公告）號: CN108795776A
• 公開（公告）日: 2018-11-13
• 發明（設計）人: 張國財;林連男;張國珍;王瑞琦;楊璟;張博文;畢冰;王婷玉;于穎穎;蔡良苑
• 申請（專利權）人: 東北林業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

提供一種用于五棱散尾鬼筆菌絲培養的培養基，屬于微生物培養領域。研究表明，五棱散尾鬼筆具有良好的農藥開發前景。現有用于培養真菌的幾種培養基培養五棱散尾鬼筆，菌絲體生長緩慢，菌絲形態稀疏、扭曲，不能滿足實驗的要求。本發明提供一種用于五棱散尾鬼筆菌絲培養的培養基，采集兩年生白樺樹樹枝、掉落的落葉松松針、掉落的白樺樹樹葉等原料，進行粉碎、超聲波等處理后，配置成瓊脂培養基，而后分裝到培養皿中，將五棱散尾鬼筆的菌絲接種于培養基上進行培養。本發明能加快五棱散尾鬼筆菌絲的生長速度，長滿9mm培養皿的時間由普通真菌培養基的14天縮短至9天。本發明培養基也適用于五棱散尾鬼筆子實體的組織分離和對五棱散尾鬼筆孢子的培養。

技術領域

本發明屬于微生物培養領域，涉及一種培養基，具體地說是一種培養五棱散尾鬼筆的培養基及其制備方法。

背景技術

五棱散尾鬼筆(Lysurus mokusin)屬于籠頭菌科(Clathracrae)，散尾鬼筆屬(Phallus)。五棱散尾鬼筆菌頭部細長，多成五棱柱形，頭部有4-5個裂片，磚紅色，初期裂片相互連在一起，后期從頂部彼此分離，內側產生暗褐色孢體粘液，具腥臭味，常能吸引蒼蠅等昆蟲。菌柄淺粉至淺肉色，具4-5條凹槽，呈海綿狀，菌托白色。又稱棱柱散尾鬼筆、五棱散尾鬼筆。

研究表明，五棱散尾鬼筆的乙醇提取物對舞毒蛾幼蟲有較好的拒食作用；正丁醇提取物對尖孢鐮刀菌和灰葡萄孢菌的生長具有明顯的抑制作用，有很好的農藥開發前景。對五棱散尾鬼筆的深入研究需要大量的菌絲體作為研究材料，但五棱散尾鬼筆的人工培養菌絲所需的培養基尚未見報道。

培養基是供微生物、植物組織和動物組織生長和維持生長的人工配制的養料，一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。常見的真菌培養基有沙堡弱培養基(SDA)、沙氏培養基(SDB)、馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)、高氏一號培養基(YMG)、淀粉培養基、麥芽浸汁瓊脂培養基(MA)、米飯培養基(rice grain medium)、察氏培養基(CZA)等。五棱散尾鬼筆菌絲體在以上幾種培養基上均生長緩慢，不能滿足實驗的要求。

發明內容

本發明要解決的技術問題，是提供一種用于五棱散尾鬼筆菌絲培養的培養基，該培養基能加快五棱散尾鬼筆菌絲的生長速度，并且使其菌絲形態良好。

本發明的技術方案是：

一種培養五棱散尾鬼筆的培養基及其制備方法是采集兩年生白樺樹樹枝、掉落的落葉松松針、掉落的白樺樹樹葉等原料，進行粉碎、超聲波等處理后，配置成瓊脂培養基，而后分裝到培養皿中，將五棱散尾鬼筆的菌絲接種于培養基上進行培養。

包括以下步驟：(是配制方法，而不是篩選過程)

1.采集兩年生新鮮白樺樹樹枝500g，掉落的落葉松松針100g，掉落的白樺樹樹葉70g，用粉碎機粉碎，加蒸餾水2000mL，超聲波處理1h，處理條件為功率300w、溫度50℃。得到處理后的提取液備用。

2.在1000mL提取液中加入土豆50g，玉米粉30g，羧甲基纖維素5g，蛋白胨10g，葡萄糖20g，KH₂PO₄ 1g，K₂HPO₄ 1g，MgSO₄ 0.5g，CaCl₂ 0.05g，KCl 0.5g，FeSO₄ 0.01g，NaNO₃0.5g，維生素B₁ 0.05g，瓊脂20g，調整pH值到5.5。

3.按常規方法配置培養基，裝瓶，121℃高壓滅菌30min。在微波爐中將培養基融化后晃動培養基，將沉淀晃動均勻，在超凈工作臺中一邊晃動培養基，一邊將培養基分裝至培養皿中，冷卻凝固后待用。

4.在超凈工作臺中將五棱散尾鬼筆菌絲接種在培養基中央，22℃避光培養。