[發(fā)明專利]GOLD優(yōu)化的CAR T-細(xì)胞

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201780053381.1
• 申請日: 2017-08-31
• 公開（公告）號: CN110121352B
• 公開（公告）日: 2020-12-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: B·王;G·茲納
• 申請（專利權(quán)）人: 嵌合體生物工程公司
• 主分類號: C12N15/63
• 分類號: C12N15/63;A61K39/00;A61K39/395;C12N5/00
• 代理公司: 北京同恒源知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11275
• 代理人: 王維綺

1.一種控制轉(zhuǎn)基因的方法，包括步驟：獲得包括受體和異源核酸的原代T-細(xì)胞，所述異源核酸包括編碼轉(zhuǎn)基因的多核苷酸，可操作地連接至編碼RNA去穩(wěn)定元件(RDE)的多核苷酸，其中RDE是富含AU的元件，其中異源核酸被轉(zhuǎn)錄以產(chǎn)生編碼可操作地連接至RDE的轉(zhuǎn)基因的轉(zhuǎn)錄物；將原代T-細(xì)胞暴露于受體的配體，其中受體與配體的結(jié)合激活原代T-細(xì)胞并且從而改變原代T-細(xì)胞的代謝狀態(tài)；和，表達(dá)轉(zhuǎn)基因，其中在改變原代T-細(xì)胞的代謝狀態(tài)后，由轉(zhuǎn)基因制備的多肽的量增加。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中受體是T細(xì)胞受體。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中轉(zhuǎn)基因編碼細(xì)胞因子、FasL、抗體、生長因子、趨化因子、切割多肽或多糖的酶、顆粒酶、穿孔素或檢查點(diǎn)抑制劑。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中轉(zhuǎn)基因編碼報(bào)道子。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中報(bào)道子可以成像，并且進(jìn)一步包括使表達(dá)配體的靶位點(diǎn)成像的步驟。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中配體是在靶細(xì)胞上發(fā)現(xiàn)的抗原。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中靶細(xì)胞是癌細(xì)胞或細(xì)菌。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，進(jìn)一步包括殺傷靶細(xì)胞的步驟。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中轉(zhuǎn)錄物中的RDE由糖酵解酶結(jié)合，所述糖酵解酶選自由磷酸甘油醛脫氫酶、烯醇酶、磷酸甘油酸酯激酶、磷酸丙糖異構(gòu)酶、醛縮酶A或磷酸甘油酸變位酶組成的組。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其中糖酵解酶是磷酸甘油醛脫氫酶。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中原代T-細(xì)胞的激活誘導(dǎo)糖酵解，其中糖酵解的激活導(dǎo)致由糖酵解酶結(jié)合轉(zhuǎn)錄物中RDE的降低。

12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，進(jìn)一步包括將第二RDE結(jié)合蛋白結(jié)合至轉(zhuǎn)錄物中的RDE的步驟。

13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中第二RDE結(jié)合蛋白的結(jié)合增加具有RDE的轉(zhuǎn)錄物的半衰期。