[發明專利]天冬氨酸蛋白酶

在審

• 申請號: 201780052704.5
• 申請日: 2017-06-22
• 公開（公告）號: CN109642226A
• 公開（公告）日: 2019-04-16
• 發明（設計）人: 顧曉崗;Z·鄒;Z·謝;H·郝;S·于;S·希普夫斯科夫
• 申請（專利權）人: 丹尼斯科美國公司
• 主分類號: C12N9/64
• 分類號: C12N9/64
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 胡志君;黃革生

1.一種重組構建體，所述重組構建體包含在生產宿主中起作用的調節序列，所述調節序列有效地連接到編碼天冬氨酸蛋白酶的核苷酸序列，所述天冬氨酸蛋白酶選自由以下組成的組：

(a)與SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:7具有至少75％序列同一性的天冬氨酸蛋白酶；

(b)與SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:9具有至少78％序列同一性的天冬氨酸蛋白酶；以及

(c)與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:8具有至少95％序列同一性的天冬氨酸蛋白酶。

2.如權利要求1所述的生產宿主，其中所述宿主選自由以下組成的組：真菌、細菌、酵母和藻類。

3.如權利要求1或2所述的生產宿主，其中天冬氨酸蛋白酶構建體是經染色體表達的或經染色體外表達的。

4.一種產生天冬氨酸蛋白酶的方法，所述方法包括：

(a)用如權利要求1所述的重組構建體轉化生產宿主；以及

(b)在產生所述天冬氨酸蛋白酶的條件下培養步驟(a)的生產宿主。

5.如權利要求4所述的方法，其中任選地從所述生產宿主回收所述天冬氨酸蛋白酶。

6.一種含有天冬氨酸蛋白酶的培養物上清液，所述培養物上清液通過如權利要求4或5中任一項所述的方法獲得。

7.一種用于表達天冬氨酸蛋白酶的重組微生物生產宿主，所述重組微生物生產宿主包含如權利要求1所述的重組構建體。

8.如權利要求7所述的生產宿主，其中所述宿主選自由以下組成的組：細菌、真菌、酵母和藻類。

9.如權利要求7或權利要求8所述的生產宿主，其中所述天冬氨酸蛋白酶構建體是經染色體表達的或經染色體外表達的。

10.天冬氨酸蛋白酶在飼料、喂養料、飼料添加劑組合物或預混物中的用途，其中所述天冬氨酸蛋白酶選自由以下組成的組：

(a)與SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:7具有至少75％序列同一性的天冬氨酸蛋白酶；

(b)與SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:9具有至少78％序列同一性的天冬氨酸蛋白酶；以及

(c)與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:8具有至少95％序列同一性的天冬氨酸蛋白酶，

其中所述天冬氨酸蛋白酶可以(i)單獨地使用或(ii)與包含至少一種細菌菌株的直接飼喂微生物組合使用或(iii)與至少一種其他酶一起使用或(iv)與包含至少一種細菌菌株的直接飼喂微生物以及至少一種其他酶組合使用。

11.一種動物飼料，所述動物飼料包含選自由以下組成的組的天冬氨酸蛋白酶：

(a)與SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:7具有至少75％序列同一性的天冬氨酸蛋白酶；

(b)與SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:9具有至少78％序列同一性的天冬氨酸蛋白酶；以及

(c)與SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:8具有至少95％序列同一性的天冬氨酸蛋白酶，

其中所述天冬氨酸蛋白酶以1-20g/噸飼料的量存在，并且進一步地其中所述天冬氨酸蛋白酶可以(i)單獨地使用或(ii)與包含至少一種細菌菌株的直接飼喂微生物組合使用或(iii)與至少一種其他酶一起使用或(iv)與包含至少一種細菌菌株的直接飼喂微生物以及至少一種其他酶組合使用。