[發明專利]甜菊醇糖苷類和其他化合物用葡萄糖-1-磷酸酯的酶促糖基化

在審

• 申請號: 201780050203.3
• 申請日: 2017-06-09
• 公開（公告）號: CN109563493A
• 公開（公告）日: 2019-04-02
• 發明（設計）人: 喬納森·弗羅姆;斯蒂芬妮·蘇·加蘭妮;奧斯卡·阿爾維左
• 申請（專利權）人: 科德克希思公司
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10;C12N15/52;C12N15/54;C12P19/00
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司 11262
• 代理人: 李敏春;鄭霞

1.一種用于使底物糖基化以產生β-糖基化產物的方法，所述方法包括以下步驟：提供至少一種糖基基團供體、至少一種糖基基團受體和至少一種糖基轉移酶；使所述糖基基團供體和所述糖基基團受體與所述糖基轉移酶在使得所述糖基基團受體被糖基化以產生至少一種具有β-葡萄糖鍵的產物的條件下接觸。

2.如權利要求1所述的方法，其中所述糖基基團供體是糖基磷酸酯。

3.如權利要求2所述的方法，其中所述糖基基團供體是葡萄糖-1-磷酸酯。

4.如權利要求1所述的方法，其中所述糖基基團受體選自糖基基團、烷氧基基團、羧基基團、氨基羰基基團、雜烷基基團、雜烯基基團、雜炔基基團、羧基烷基基團、氨基烷基基團、鹵代烷基基團、烷硫基烷基基團、雜環烷基基團、雜芳基基團和雜芳基烷基基團。

5.如權利要求1所述的方法，其中具有β-葡萄糖鍵的所述產物是甜菊醇糖苷。

6.如權利要求1所述的方法，其中所述糖基基團受體是甜菊苷，所述糖基基團供體是α-葡萄糖-1-磷酸酯，并且具有β-葡萄糖鍵的所述產物是萊鮑迪苷A。

7.如權利要求1-6中任一項所述的方法，其中所述糖基轉移酶選自SEQ ID NO:2、4、6、8、10、12和14中列出的多肽。

8.一種用于產生葡萄糖-1-磷酸酯的方法，所述方法包括以下步驟：提供磷酸化酶、無機磷酸和所述磷酸化酶的二糖、三糖或寡糖底物；使所述磷酸化酶、無機磷酸和糖在使得所述糖被裂解以產生單糖和葡萄糖-1-磷酸酯的條件下接觸。

9.如權利要求8所述的方法，其中將如權利要求8所述的方法與如權利要求1所述的方法組合。

10.如權利要求9所述的方法，其中所述葡糖基基團受體選自糖基基團、烷氧基基團、羧基基團、氨基羰基基團、雜烷基基團、雜烯基基團、雜炔基基團、羧基烷基基團、氨基烷基基團、鹵代烷基基團、烷硫基烷基基團、雜環烷基基團、雜芳基基團和雜芳基烷基基團。

11.如權利要求9所述的方法，其中所述磷酸化酶是蔗糖磷酸化酶，所述糖是蔗糖，產生的所述單糖是蔗糖，并且產生的所述葡萄糖-1-磷酸酯是α-葡萄糖-1-磷酸酯。

12.如權利要求8-11所述的方法，其中所述磷酸化酶包含選自SEQ IDNO:16、18、20、22、24、26、28、30和32的多肽序列。