[發明專利]具有經修飾的糖蛋白B的皰疹病毒

在審

• 申請號: 201780048896.2
• 申請日: 2017-06-08
• 公開（公告）號: CN109563490A
• 公開（公告）日: 2019-04-02
• 發明（設計）人: M·G·坎帕代利;B·彼得洛維奇
• 申請（專利權）人: 大學之母博洛尼亞大學
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;C07K14/035;C12N15/62;C12N5/10;C12N15/869;A61K35/763
• 代理公司: 北京市君合律師事務所 11517
• 代理人: 趙昊;顧云峰

1.一種重組皰疹病毒，所述重組皰疹病毒包含異源多肽配體，所述異源多肽配體能夠與靶分子結合并且融合至或插入存在于所述皰疹病毒的包膜中的糖蛋白B(gB)，

其中所述配體融合至gB，或者

其中所述配體在gB無序區域內的任何氨基酸處插入，但是不在如SEQ ID NO:1所示的gB的跨氨基酸77至88的區域內，或同源gB的對應區域內的任何氨基酸處插入，或者

其中所述配體在如SEQ ID NO:1所示的gB的跨氨基酸31至77或88至184，優選地氨基酸31至77或88至136或者更優選地31至77或88至108，和/或跨氨基酸409至545，優選地氨基酸459至545，更優選地氨基酸459至497或甚至更優選地氨基酸460至491的區域內，或同源gB的對應區域內的任何氨基酸處插入。

2.一種重組皰疹病毒，所述重組皰疹病毒包含異源多肽配體，所述異源多肽配體能夠與靶分子結合并且插入存在于所述皰疹病毒的包膜中的糖蛋白B(gB)，

其中所述配體的長度為5至120個氨基酸并且在如SEQ ID NO:1所示的gB的跨氨基酸77至88的區域內，或同源gB的對應區域內的任何氨基酸處插入。

3.根據權利要求1或2所述的皰疹病毒，其中所述皰疹病毒具有與表達或結合所述靶分子的細胞結合的能力，優選地具有與所述細胞膜融合的能力，更優選地具有進入所述細胞的能力，最優選地具有殺死所述細胞的能力。

4.根據權利要求1至3中任意一項所述的皰疹病毒，其中所述靶分子存在于患病細胞上，優選地其中所述患病細胞是腫瘤細胞、感染細胞、退行性病癥相關細胞或衰老細胞，或者

其中所述靶分子存在于細胞培養物中存在的細胞上，優選地其中所述細胞是適于所述皰疹病毒生長的培養細胞，更優選地是批準用于皰疹病毒生長的細胞系，甚至更優選地是Vero、293、293T、HEp-2、HeLa、BHK或RS細胞，最優選地是Vero細胞。

5.根據權利要求1至4中任意一項所述的皰疹病毒，其中存在于患病細胞上的所述靶分子是腫瘤相關受體，優選地是EGF受體家族成員，包括HER2、EGFR、EGFRIII、或EGFR3(ERBB3)、EGFRvIII，或MET、FAP、PSMA、CXCR4、CEA、CADC、粘蛋白、葉酸結合蛋白、GD2、VEGF受體1和2、CD20、CD30、CD33、CD52、CD55、整合素家族、IGF1R、Ephrin受體家族、蛋白-酪氨酸激酶(TK)家族、RANKL、TRAILR1、TRAILR2、IL13Rα、UPAR、腱生蛋白、免疫檢查點家族調節因子成員，包括PD-1、PD-L1、CTL-A4、TIM-3、LAG3或IDO，腫瘤相關糖蛋白72、神經節苷酯GM2、A33、Lewis Y抗原或MUC1，最優選地是HER2，或者

其中存在于細胞培養物中存在的細胞上的所述靶分子是人造分子，優選地是抗體、抗體衍生物或抗體模擬物，更優選地是單鏈抗體(scFv)，甚至更優選地是能夠與GCN4酵母轉錄因子的一部分結合的scFv，甚至更優選地是能夠與GCN4酵母轉錄因子的包含SEQ ID NO:37的部分結合的scFv，甚至更優選地是包含SEQ ID NO:39的scFv，最優選地是SEQ ID NO:41的序列所示的分子。

6.根據權利要求1至5中任意一項所述的皰疹病毒，其中所述配體是天然多肽或人造多肽

優選地其中所述配體能夠與存在于細胞培養物中存在的細胞上的靶分子或存在于患病細胞上的靶分子結合

更優選地其中所述配體是在細胞上可接近的靶分子的天然配體、能夠與所述靶分子結合的天然配體的一部分、天然多肽的一部分、抗體、抗體衍生物、抗體模擬物更優選地其中所述配體是能夠與存在于細胞培養物中存在的細胞上的靶分子結合的天然多肽的一部分或scFv

甚至更優選地其中所述配體是GCN4酵母轉錄因子的一部分，例如GCN4酵母轉錄因子的包含SEQ ID NO:37的部分，或能夠與存在于腫瘤分子上的靶分子結合，優選地與HER2結合的scFv，

最優選地其中所述配體是SEQ ID NO:37的序列所示的分子或SEQ ID NO:32所示的scFv。