[發明專利]側流裝置及使用方法

有效

• 申請號: 201780045129.6
• 申請日: 2017-07-21
• 公開（公告）號: CN109477835B
• 公開（公告）日: 2022-08-16
• 發明（設計）人: W·斯特朗
• 申請（專利權）人: 生物輻射實驗室股份有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/53;G01N33/569
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 王穎;江磊

提供了用于進行側流Western印跡試驗的側流裝置，方法和試劑盒。側流裝置包括：由多孔材料構成的芯吸墊，所述芯吸墊具有用于施加包含固定的分析物的基材的區域，其中，所述芯吸墊具有第一端、第二端和兩個側邊；第一儲器，其包括位于芯吸墊的第一端上的多個試劑層的堆疊；第二儲器，其包括位于芯吸墊的第二端上的吸收墊。

本申請要求2016年7月25日提交的美國臨時申請62/366,496的權益，該申請通過引用整體并入本文。

背景

生物科學中經常使用檢測固定的分析物的方法。例如，常規印跡(例如，Southern、Northern、Western、Far Western、Eastern、真空、Middle Eastern、 Eastern-Western和Far-Eastern印跡等)可用于檢測固定在基材或膜上或基質中(例如，在瓊脂糖或丙烯酰胺中)的分析物。一般而言，這類印跡技術涉及固定待檢測的分析物和使分析物接觸結合試劑(例如，抗體)。印跡也通常在固定和最終檢測之間包括多個洗滌步驟和/或封閉步驟。這類洗滌和封閉步驟消耗了實施者有限的時間和/或試劑，并且可以是誤差和不可再現性的來源。

發明內容

本文提供了側流裝置及使用方法。

在一個實施方式中，所述裝置包括：由多孔材料構成的芯吸墊，所述芯吸墊具有用于施加包含固定的分析物(例如蛋白質)的基材的區域，其中，所述芯吸墊具有第一端、第二端和兩個側邊；第一儲器，其包括位于芯吸墊的第一端上的多個試劑層的堆疊；第二儲器，其包括位于芯吸墊的第二端上的吸收墊。在一些實施方式中，多個試劑層中的每一層包含固定在吸收墊中的試劑。在一些實施方式中，每個試劑層包括涂覆或結合在一部分下表面上的薄阻擋層。在某些實施方式中，多個試劑層中的每一層包含在溶液中的試劑。在某些實施方式中，多個試劑層中的每一層包含密度劑。在一些實施方式中，密度劑選自下組：甘油、蔗糖、海藻糖、葡聚糖和聚乙二醇。在某些實施方式中，多個試劑層中的每一層在其中具有不同的試劑。

在多個試劑層中的每一層包含在溶液中的試劑的一些實施方式中，第一儲器是圓筒或槽，其在第一端具有流體流量控制器以控制溶液從第一儲器釋放。在某些實施方式中，流體流量控制器是閥。在一些實施方式中，流體流量控制器是寬度在約0.5mm至約2mm范圍內的狹縫。在一些實施方式中，狹縫的寬度為約0.5mm或約1mm。

在某些實施方式中，試劑層中的試劑選自下組：一抗、二抗、第一洗滌溶液和第二洗滌溶液。在一些實施方式中，多個試劑層從與芯吸墊接觸的試劑層開始，包含具有一抗的第一試劑層、具有第一洗滌溶液的第二試劑層、具有二抗的第三試劑層和具有第二洗滌溶液的第四試劑層。在一些實施方式中，多個試劑層從第一儲器的第一端處或附近的試劑層開始，包含具有一抗的第一試劑層、具有第一洗滌溶液的第二試劑層、具有二抗的第三試劑層和具有第二洗滌溶液的第四試劑層。在某些實施方式中，第四試劑層的厚度是第三試劑層的至少兩倍。在一些實施方式中，第一儲器具有包含第二洗滌溶液的第五試劑層。在某些實施方式中，第一儲器中第二洗滌溶液的體積至少是二抗體積的兩倍。

在多個試劑層中的每一層由吸收墊形成的實施方式中，第一試劑層的至少一部分與芯吸墊緊密接觸。

在具有吸收試劑層的一些實施方式中，該裝置密封在塑料外殼中。在一些實施方式中，塑料外殼包括模制的底部部分和密封于底部部分的平面蓋子。在一些實施方式中，芯吸墊和儲器是干燥的。在一些實施方式中，芯吸墊和第一儲器中的至少一個是濕的。