[發明專利]增加微藻中ω-3多不飽和脂肪酸產量的方法

在審

• 申請號: 201780042821.3
• 申請日: 2017-05-11
• 公開（公告）號: CN109477079A
• 公開（公告）日: 2019-03-15
• 發明（設計）人: A-C·V·貝恩;R·E·齊克勒
• 申請（專利權）人: 帝斯曼知識產權資產管理有限公司
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10;C12P7/64;C12N1/12;C12N15/82
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務所 11494
• 代理人: 封新琴

1.一種重組微藻，其中該重組微藻經修飾以改變編碼多不飽和脂肪酸合酶的基因的表達水平，包括改變編碼多不飽和脂肪酸合酶亞基1(PFA1)的PFA1、和/或編碼多不飽和脂肪酸合酶亞基2(PFA2)的PFA2、和/或編碼多不飽和脂肪酸合酶亞基3(PFA3)的PFA3、和/或其功能等效物的表達；并且其中當與宿主微藻相比時，該重組微藻產生的脂質中的二十碳五烯酸(EPA)的水平增加。

2.權利要求1的重組微藻，其中該重組微藻經修飾以與該宿主微藻相比時增加PFA1和/或PFA3、或其功能等效物的表達水平。

3.權利要求2的重組微藻，其中相對于該宿主微藻，PFA1和/或PFA3的表達增加至少1.5倍。

4.權利要求1-3中任一項的重組微藻，其中該微藻是網粘菌綱。

5.權利要求4的重組微藻，其中該網粘菌綱是破囊壺菌。

6.權利要求5的重組微藻，其中該破囊壺菌是裂殖壺菌屬或破囊壺菌屬。

7.權利要求6的重組微藻，其中該破囊壺菌是裂殖壺菌屬。

8.權利要求1-7中任一項的重組微藻，其中該重組微藻經修飾以增加PFA1的表達。

9.權利要求1-8中任一項的重組微藻，其中該重組微藻經修飾以增加PFA1和PFA3的表達。

10.權利要求1-9中任一項的重組微藻，其中該微藻經修飾以過表達編碼PFA1的基因和/或編碼PFA3的基因、或其功能等效物。

11.權利要求1-10中任一項的重組微藻，其中通過源自于該宿主微藻的啟動子驅動PFA1和/或PFA3的表達。

12.權利要求1-11中任一項的重組微藻，其中該微藻經修飾以包含編碼PFA1的基因和/或編碼PFA3的基因的多個拷貝。

13.權利要求10-13中任一項的重組微藻，其中該編碼PFA1的基因與SEQ ID NO:1是至少80％相同的或是編碼如下多肽的多核苷酸序列，該多肽包含與SEQ ID NO:2至少80％相同的氨基酸序列；并且其中該編碼PFA3的基因與SEQ ID NO:5是至少80％相同的或是編碼如下多肽的多核苷酸序列，該多肽包含與SEQ ID NO:6至少80％相同的氨基酸序列。

14.權利要求12-13中任一項的重組微藻，其中該微藻包含該編碼PFA1的基因的2與10個之間的拷貝。

15.權利要求12-14中任一項的重組微藻，其中該微藻包含該編碼PFA1的基因的3與7個之間的拷貝。

16.權利要求12-15中任一項的重組微藻，其中該微藻包含該編碼PFA1的基因的4與6個之間的拷貝。

17.權利要求1-16中任一項的重組微藻，其中使內源性多不飽和脂肪酸(PUFA)合酶基因中的一個或多個缺失。

18.權利要求1-16中任一項的重組微藻，其中使內源性多不飽和脂肪酸(PUFA)合酶基因中的一個或多個突變。

19.權利要求1-18中任一項的重組微藻，其中相對于該宿主微藻，該脂質中的EPA增加至少2倍。

20.權利要求1-18中任一項的重組微藻，其中相對于該宿主微藻，該脂質富含二十二碳六烯酸(DHA)。