[發明專利]用于病毒抗原的血清學檢測的方法

有效

• 申請號: 201780033251.1
• 申請日: 2017-05-31
• 公開（公告）號: CN109154616B
• 公開（公告）日: 2022-07-12
• 發明（設計）人: R.波爾哈根;B.尤普邁爾;T.扎恩特;P.明希;M.京特
• 申請（專利權）人: 豪夫邁·羅氏有限公司
• 主分類號: G01N33/576
• 分類號: G01N33/576
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 權陸軍;黃念

本發明涉及檢測來自受試者的樣品中丙型肝炎病毒（HCV）的核心多肽的方法，包括：（a）使所述樣品與堿并與包含陽離子去污劑的表面活性劑接觸，和（b）檢測所述樣品中所述HCV的核心多肽。本發明進一步涉及預處理來自受試者的樣品以用于檢測HCV的方法，包括使所述樣品與堿并與包含陽離子去污劑的表面活性劑接觸；且涉及用于檢測樣品中HCV的預處理試劑，包含堿和包含陽離子去污劑的表面活性劑，其中所述表面活性劑進一步包含非離子型去污劑。此外，本發明進一步涉及與本發明方法有關的試劑盒、用途和設備。

發明領域

本發明涉及檢測來自受試者的樣品中丙型肝炎病毒（HCV）的核心多肽的方法，所述方法包括（a）使所述樣品與堿并與包含陽離子去污劑的表面活性劑接觸，和（b）檢測所述樣品中所述HCV的核心多肽。本發明進一步涉及預處理來自受試者的樣品以用于檢測HCV的方法，包括使所述樣品與堿并與包含陽離子去污劑的表面活性劑接觸；且涉及用于檢測樣品中HCV的預處理試劑，包含堿和包含陽離子去污劑的表面活性劑，其中所述表面活性劑進一步包含非離子型去污劑。此外，本發明進一步涉及與本發明方法有關的試劑盒、用途和設備。

相關技術

丙型肝炎病毒（HCV）是黃病毒科（Flaviviridae）丙型肝炎病毒屬（Hepacivirus）的小的有包膜病毒，包含+-鏈單鏈RNA作為基因組。在HCV顆粒中，核心蛋白與RNA基因組締合，形成衣殼樣結構，其被包含病毒糖蛋白E1和E2的膜包圍。HCV包括至少六種或七種基因型，并被鑒定為也稱為非甲非乙型肝炎的丙型肝炎的病原體。

HCV感染的診斷通常在血液衍生的樣品中進行，一般免疫學檢測病毒核心蛋白或檢測抗-HCV抗體或兩者，或通過PCR檢測病毒基因組。用于檢測HCV并且特別是用于檢測HCV核心多肽的免疫測定中的通常重要的方面是提供高度靈敏且高度特異性的測試，其在感染后的所有階段可靠地檢測感染的樣品，同時錯誤結果例如假陽性的數目應保持盡可能小。此外，對干擾的敏感性也是不期望的，這是因為這經常導致不清楚或錯誤的結果，這使得進一步昂貴且耗時的調查成為必要。本領域中使用的免疫學方法包括在有去污劑和/或離液劑的情況下的酸性或中性處理的各種組合（EP 0 967 484 A1、EP 1 020 727 A1、EP 1691198 A1），或在堿性pH用離液劑處理樣品或從其沉淀的病毒（JP 1999178174A；EP 2 327987 A2；Tanaka等人（1995)，J Hepatol 23：742），旨在分解病毒顆粒以增加測定的靈敏度。出于相同目的，還使用高鹽濃度（EP 1 083 428 A2）。然而，酸處理引起可逆變性，這可以允許病毒顆粒的至少部分重裝配。此外，來自血液樣品的潛在混雜的免疫球蛋白也可能復性，并因此不能有效地除去。

要解決的問題

因此，本發明的目的是提供用于檢測HCV的改進的手段和方法，其至少部分地避免了現有技術的缺點，特別是在增加特異性和/或降低對干擾的敏感性方面。

發明概述

通過具有獨立權利要求的特征的本發明的手段和方法解決了該問題。在從屬權利要求中列出了可以以孤立方式或以任何任意組合實現的優選實施方案。

因此，本發明涉及檢測來自受試者的樣品中丙型肝炎病毒（HCV）的核心多肽的方法，所述方法包括：

（a）使所述樣品與堿并與包含陽離子去污劑的表面活性劑接觸，和

（b）檢測所述樣品中所述HCV的核心多肽。

如下文所使用的，術語“具有”、“包含”或“包括”或其任何任意語法變化形式以非排他的方式使用。因此，這些術語既可以指除了由這些術語引入的特征之外在該上下文中描述的實體中不存在另外的特征的情況，又可以指其中存在一個或多個另外的特征的情況。作為示例，措辭“A具有B”、“A包含B”和“A包括B”可以既指除了B之外，A中不存在其他要素的情況（即，A完全且排他地由B組成的情況），又指除了B之外，在實體A中存在一個或多個另外的要素的情況，例如要素C、要素C和D或甚至另外的要素。