[發明專利]用于治療視網膜視錐細胞的疾病的基因療法

在審

• 申請號: 201780015487.2
• 申請日: 2017-02-23
• 公開（公告）號: CN109310785A
• 公開（公告）日: 2019-02-05
• 發明（設計）人: S·米查拉基斯;M·貝爾;M·西里格
• 申請（專利權）人: 眼服務有限責任公司
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;C07K14/705
• 代理公司: 北京市金杜律師事務所 11256
• 代理人: 陳文平;徐志明

1.一種多核苷酸，其包含

轉基因表達盒，該轉基因表達盒包含

(a)編碼人視網膜抑制蛋白3基因(hArr3)的啟動子的核酸；

(b)編碼人視錐環核苷酸門控通道α3亞基(hCNGA3)或其片段的核酸；和

(c)編碼調控元件的核酸。

2.如權利要求1所述的多核苷酸，其中所述調控元件包含

(c1)編碼土撥鼠口炎病毒轉錄后調控元件(WPRE)的核酸。

3.如權利要求2所述的多核苷酸，其中所述WPRE是突變的WPRE(WPREm)，所述WPREm包含不可表達的土撥鼠肝炎病毒X蛋白(WHX)開放閱讀框(WHX OR)。

4.如權利要求1-3任一項所述的多核苷酸，其中所述調控元件包含

(c2)編碼多腺苷酸化信號(pA)的核酸。

5.如權利要求4所述的多核苷酸，其中所述pA是牛生長激素pA(BGH pA)。

6.如前述權利要求任一項所述的多核苷酸，其中它進一步包含編碼側鄰所述轉基因表達盒的末端反向重復序列(ITRs)的核酸，優選地至少一個鄰近所述hArr3啟動子的ITR(L-ITR)和至少一個鄰近所述pA的ITR(R-ITR)。

7.如權利要求6所述的多核苷酸，其中所述ITRs源自AAV血清型2(ITR AAV2)。

8.如前述權利要求任一項所述的多核苷酸，包含以下排列順序：

(a)-(b)-(c)，

優選地(a)-(b)-(c1)-(c2)，

進一步優選地(L-ITR)-(a)-(b)-(c1)-(c2)-(R-ITR)。

9.如前述權利要求任一項所述的多核苷酸，其中所述編碼hArr3的啟動子的核酸包含SEQ ID No.1的核苷酸序列。

10.如前述權利要求任一項所述的多核苷酸，其中所述編碼hCNGA3的核酸包含SEQ IDNo.2的核苷酸序列或包含編碼SEQ IDNo.3的氨基酸序列的核苷酸序列。

11.如權利要求3-10任一項所述的多核苷酸，其中所述編碼WPREm的核酸包含SEQ IDNo.4的核苷酸序列。

12.如權利要求5-11任一項所述的多核苷酸，其中所述編碼BGHpA的核酸包含SEQ IDNo.5的核苷酸序列。

13.如權利要求6-12任一項所述的多核苷酸，其中所述編碼L-ITR的核酸包含SEQ IDNo.6的核苷酸序列和/或所述編碼R-ITR的核酸包含SEQ ID No.7的核苷酸序列。

14.一種核酸載體，包含權利要求1-13任一項所述的多核苷酸。

15.如權利要求14所述的核酸載體，其是進一步包含長度≥5,000bp，優選≥5,500bp的骨架的環狀質粒。

16.如權利要求15所述的核酸載體，其中所述骨架包含≤5個開放閱讀框(ORFs)，優選≤4個ORFs，進一步優選≤3個ORFs，進一步優選≤2個ORFs，進一步優選≤1個ORFs，非常優選0個ORFs。

17.如權利要求15或16所述的核酸載體，其中所述骨架包含選擇標記，優選抗生素抗性編碼核酸，進一步優選卡那霉素抗性編碼核酸(KanR)。