[發明專利]多磷酸依存性葡萄糖激酶與用其制備葡萄糖-6-磷酸的方法

有效

• 申請號: 201780006746.5
• 申請日: 2017-01-16
• 公開（公告）號: CN108699538B
• 公開（公告）日: 2022-09-20
• 發明（設計）人: 梁成才;李英美;金成俌;樸承源;趙顯國
• 申請（專利權）人: CJ第一制糖株式會社
• 主分類號: C12N9/12
• 分類號: C12N9/12;C12P19/02;C12N15/70
• 代理公司: 北京同立鈞成知識產權代理有限公司 11205
• 代理人: 彭雪瑞;臧建明

1.來源于奇異球菌屬的耐熱性的多磷酸依存性葡萄糖激酶用于制備葡萄糖-6-磷酸的用途，其中所述多磷酸依存性葡萄糖激酶的氨基酸序列如序列號2所示或由序列號1的DNA序列編碼，及所述葡萄糖-6-磷酸是由葡萄糖和多磷酸通過所述耐熱性的多磷酸依存性葡萄糖激酶在40℃至60℃的溫度下而生產。

2.一種在40℃至60℃的溫度下制備葡萄糖-6-磷酸的方法，其自包含來源于奇異球菌屬的耐熱性的多磷酸依存性葡萄糖激酶、葡萄糖及多磷酸的組成物來制備葡萄糖-6-磷酸，

其中所述多磷酸依存性葡萄糖激酶的氨基酸序列如序列號2所示或由序列號1的DNA序列編碼。

3.根據權利要求2所述的制備葡萄糖-6-磷酸的方法，其中所述葡萄糖是通過使淀粉或纖維素液化或糖化而制備。

4.根據權利要求2所述的制備葡萄糖-6-磷酸的方法，其中所述多磷酸為六偏磷酸鈉。

5.根據權利要求2所述的制備葡萄糖-6-磷酸的方法，其中于pH7至pH9的條件下進行所述葡萄糖-6-磷酸的制備。

6.根據權利要求2所述的制備葡萄糖-6-磷酸的方法，其中所述組成物進一步包含鎂離子。

7.根據權利要求2所述的制備葡萄糖-6-磷酸的方法，其中所述多磷酸依存性葡萄糖激酶的含量為0.1 mg/ml至0.5 mg/ml。

8.根據權利要求2所述的制備葡萄糖-6-磷酸的方法，其中以所述組成物的體積為基準，所述葡萄糖為1重量%至30重量%。

9.根據權利要求2所述的制備葡萄糖-6-磷酸的方法，其中以所述組成物的體積為基準，所述多磷酸為1重量%至10重量%。

10.一種在40℃至60℃的溫度下自組成物制備葡萄糖-6-磷酸的方法，所述組成物包含來源于奇異球菌屬的耐熱性的多磷酸依存性葡萄糖激酶、糖化酶、淀粉及多磷酸，

其中所述多磷酸依存性葡萄糖激酶的氨基酸序列如序列號2所示。

11.根據權利要求10所述的自組成物制備葡萄糖-6-磷酸的方法，其中所述糖化酶為α-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶及α-葡萄糖苷酶中的至少一者。

12.重組表達載體用于制備葡萄糖-6-磷酸的用途，所述重組表達載體包含編碼多磷酸依存性葡萄糖激酶的基因，

其中所述多磷酸依存性葡萄糖激酶的氨基酸序列如序列號2所示，及所述葡萄糖-6-磷酸是由葡萄糖和多磷酸通過所述耐熱性的多磷酸依存性葡萄糖激酶在40℃至60℃的溫度下而生產。

13.大腸桿菌BL21 DE3 CJ pET21a-Dg_ppgk用于制備葡萄糖-6-磷酸的用途，其中所述葡萄糖-6-磷酸是由葡萄糖和多磷酸通過耐熱性的多磷酸依存性葡萄糖激酶在40℃至60℃的溫度下而生產，

其中所述大腸桿菌的保藏機構為韓國微生物保藏中心、保藏日為2015.12.17及保藏號為KCCM11793P。

14.一種通過來源于奇異球菌屬的耐熱性的多磷酸依存性葡萄糖激酶、葡萄糖或淀粉、多磷酸及其他酶產生反應而生產葡萄糖-1-磷酸、果糖-6-磷酸、果糖-1,6-二磷酸、肌醇-3-磷酸、肌醇、葡萄糖醛酸、葡萄糖胺-6-磷酸、葡萄糖胺、N-乙酰葡萄糖胺-6-磷酸、N-乙酰葡萄糖胺、N-乙酰甘露糖胺-6-磷酸、N-乙酰甘露糖胺、N-乙酰神經胺糖酸、甘露糖-6-磷酸、甘露糖、塔格糖-6-磷酸、塔格糖、阿洛酮糖-6-磷酸、阿洛酮糖、甘油醛-3-磷酸及二羥丙酮磷酸中的任一種的方法，

其中所述多磷酸依存性葡萄糖激酶的氨基酸序列如序列號2所示或由序列號1的DNA序列編碼，及在40℃至60℃的溫度下通過來源于奇異球菌屬的耐熱性的多磷酸依存性葡萄糖激酶、葡萄糖或淀粉及多磷酸產生反應。