[實用新型]一種單個核細胞分離管

有效

• 申請號: 201720704042.2
• 申請日: 2017-06-16
• 公開（公告）號: CN207079232U
• 公開（公告）日: 2018-03-09
• 發明（設計）人: 何向鋒;施文
• 申請（專利權）人: 何向鋒
• 主分類號: C12M1/24
• 分類號: C12M1/24;C12N5/078
• 代理公司: 北京商專永信知識產權代理事務所(普通合伙)11400
• 代理人: 高之波,倪金磊

技術領域

本實用新型涉及細胞分離技術領域，具體涉及一種單個核細胞分離管。

背景技術

腫瘤的細胞過繼免疫治療是繼手術、化療和放療之后的第四種腫瘤治療方法。體外培養自體免疫細胞時，需要預先采集患者50～100ml外周血，并分離外周血中具有的單個核細胞，即外周血單個核細胞(Peripheral blood mononuclear cell，PBMC)，包括淋巴細胞和單核細胞。目前主要的分離方法是應用樣本密度分離液進行密度梯度離心，因為血液中各有形成分的比重存在差異，因此得以分離。紅細胞和粒細胞密度大于分離液沉積于管底。血小板則因密度小而懸浮于血漿中，唯有與分離液密度相當的單個核細胞密集在血漿層和分離液的界面中，呈白膜狀，吸取該層細胞經過洗滌離心重懸，即可用于治療用途的免疫細胞體外擴增培養。

目前，在應用樣本密度分離液進行PBMC分離時，采用的離心管最大規格多為15ml或50ml，每次每管分離的外周血樣本量為10～15ml，加樣時操作要求高，一不小心即會導致抗凝血與樣本密度分離液相混，影響單個核細胞的分離效果。市場上有一種Greiner bio-one的淋巴/單核細胞分離管，包含一個高質量聚乙烯的多孔篩板，該版穩固地嵌入聚丙烯材質的離心管中，通過嚴格控制篩板的孔徑大小來分離細胞，大大縮短了樣本的處理時間。該種分離管主要有兩種規格：12ml和50ml，其50ml分離管每次處理樣本量為15～30ml血樣，較傳統方法使用的普通離心管增加了樣本處理量，縮短了處理時間，減小了操作難度，提高了工作效率，但該產品使用成本較高，有必要進一步開發出價廉物美的外周血單個核細胞的分離耗材。

實用新型內容

本實用新型的目的提供一種細胞分離管及其使用方法，解決上述現有技術問題中的一個或者多個。

根據本實用新型的一種單個核細胞分離管，包括離心管，所述離心管的管口處設有偏側漏斗隔板，所述離心管內下半部橫截面處設有錐窩孔板；所述偏側漏斗隔板與所述離心管的半側管壁形成一偏側漏斗結構，所述錐窩孔板上均勻間隔分布有若干正錐窩孔和倒錐窩孔。

在一些實施方式中，所述偏側漏斗隔板包括隔板部和連接于所述隔板部下方的偏側漏斗部，所述隔板部豎直分布于所述離心管內，所述隔板部兩側緣與所述離心管內壁相貼合，所述隔板部將離心管管口分為偏側漏斗半圓口和離心管半圓口兩部分，所述偏側漏斗部向一側管壁收攏，與該側離心管管壁共同形成偏側漏斗，所述偏側漏斗部的底端設有緊貼管壁的半環形開口，所述開口寬度為0.1mm～3mm。

在一些實施方式中，所述錐窩孔板為與所述離心管橫截面相適應的圓形板，所述正錐窩孔和倒錐窩孔均勻間隔分布，所述正錐窩孔上孔口小，下孔口大，所述倒錐窩孔上孔口大，下孔口小，所述正錐窩孔和所述倒錐窩孔為圓錐形、正六邊錐形、方錐形、菱形錐形、矩形錐形、三角錐形、正弦曲線錐形中的一種或多種的組合，所述錐窩孔板周緣與所述離心管內壁相貼合。

在一些實施方式中，所述錐窩孔板的厚度為2mm～8mm，所述正錐窩孔和所述倒錐窩孔之間的錐窩壁的壁厚度為0.1mm～3mm，所述錐窩壁與正錐窩孔和倒錐窩孔中軸線的夾角為20°～80°。

本實用新型中所提供的一種細胞分離管，管口設有偏側漏斗隔板，與一側離心管壁共同形成偏側漏斗結構，在保持分離管直立的情況下，直接經偏側漏斗結構倒入抗凝血，可以保證抗凝血沿離心管壁下流；采用錐窩孔板結構，允許快速將血液樣本加到密度梯度離心液的液面上，并能防止血液層與離心液的混合，離心結束時，減速無需過于平緩漫長。離心后，既可用吸管吸取PBMC細胞層，也可直接將錐窩孔板上方的血漿層、PBMC細胞層和部分樣本密度分離液輕松快速倒入新的常規離心管中，由于錐窩孔板的分隔緩沖作用，其下方的紅細胞不會隨之倒出；將倒出的混合物再次常規離心獲取的細胞沉淀即是PBMC；只需較短的時間即可輕松完成PBMC的分離，且整個過程一致性好，省時省力，使PBMC分離簡便，快捷，一致。

附圖說明

圖1為本實用新型的一種實施方式的一種單個核細胞分離管的結構示意圖；

圖2為本實用新型的一種實施方式的一種單個核細胞分離管去除管蓋的結構示意圖；

圖3為本實用新型的一種實施方式的一種單個核細胞分離管的錐窩孔板的俯視結構示意圖；

圖4為本實用新型的一種實施方式的一種單個核細胞分離管的錐窩孔板的側視結構示意圖。

具體實施方式

下面結合說明書附圖，對本實用新型進行進一步詳細的說明。