[發(fā)明專利]一種土壤中泰樂菌素殘留量的檢測方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201711479861.2
• 申請日: 2017-12-29
• 公開（公告）號: CN108226339A
• 公開（公告）日: 2018-06-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王義;張鵬;金昌福;李寧飛
• 申請（專利權(quán)）人: 寧夏希望田野生物農(nóng)業(yè)科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標(biāo)事務(wù)所 23109
• 代理人: 賈澤純

1.一種土壤中泰樂菌素殘留量的檢測方法，其特征在于它是按照以下步驟進(jìn)行的：

一、供試品樣品制備：

1)稱取含有泰樂菌素的土壤，加入提取劑，渦旋振蕩1～5min后，于超聲中輔助提取20～30min，以3000～4000rpm離心5～10min，取上清液，并收集沉淀備用；

2)向上步收集的沉淀中加入提取劑，渦旋振蕩1min后，于超聲中輔助提取30min，以3000～4000rpm離心10min，取上清液；

3)合并步驟1)和步驟2)的上清液，將上清液于40℃水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至原體積的1/4～1/5，得無機(jī)相，向無機(jī)相中加入甲醇溶液以及pH為5.5、濃度為0.15mol/L的乙酸鈉緩沖溶液；充分震蕩渦旋，待殘渣全部溶解后，轉(zhuǎn)移到離心管中，得待凈化樣品；

4)用甲醇和超純水對HLB固相萃取柱進(jìn)行活化，加入待凈化樣品，以1mL/min速度過柱，待樣液全部流出后，用水和淋洗液依次進(jìn)行淋洗，抽干所有的液體，分析物用甲醇洗脫并收集，搖勻，過0.45μm濾膜后，得供試品樣品；

二、標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：用甲醇將泰樂菌素標(biāo)準(zhǔn)貯備液稀釋成質(zhì)量濃度為1.00mg/L、5.00mg/L、10.00mg/L、20.00mg/L、50.00mg/L、100.00mg/L和200.00mg/L標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，采用高效液相色譜儀對上述標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)行檢測，以測得峰面積為作縱坐標(biāo)，以標(biāo)準(zhǔn)工作溶液濃度作為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，求回歸方程和相關(guān)系數(shù)；

三、測定：吸取上述標(biāo)準(zhǔn)工作品溶液和供試品樣品注入液相色譜儀中，根據(jù)外標(biāo)法計算泰樂菌素殘留量；采用高效液相色譜儀對土壤中殘留泰樂菌素進(jìn)行測定；

色譜條件：色譜柱：Agilent TC-C18柱，色譜柱內(nèi)徑為4.6mm，柱長250mm，填料顆粒直徑為5μm，流動相：乙腈-0.01moL/L磷酸二氫鉀溶液等度洗脫，檢測波長：290nm，進(jìn)樣量：20μL，流速：1mL/min，柱溫：30℃。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種土壤中泰樂菌素殘留量的檢測方法，其特征在于泰樂菌素土壤與提取劑的質(zhì)量體積比為1g：10mL。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種土壤中泰樂菌素殘留量的檢測方法，其特征在于沉淀與提取劑的質(zhì)量體積比為1g：10mL。

4.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的一種土壤中泰樂菌素殘留量的檢測方法，其特征在于提取劑為pH＝4的質(zhì)量百分含量為90％乙腈水溶液。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種土壤中泰樂菌素殘留量的檢測方法，其特征在于淋洗液為含體積百分含量為2％的氨水和體積百分含量為5％甲醇的水溶液。

6.根據(jù)權(quán)利要求1或5所述的一種土壤中泰樂菌素殘留量的檢測方法，其特征在于水與淋洗液的體積比為1:1。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種土壤中泰樂菌素殘留量的檢測方法，其特征在于磷酸二氫鉀溶液的pH＝2.5。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種土壤中泰樂菌素殘留量的檢測方法，其特征在于無機(jī)相、甲醇溶液及乙酸鈉緩沖溶液的體積比為4:1:1。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種土壤中泰樂菌素殘留量的檢測方法，其特征在于甲醇和超純水的比例為1:1。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種土壤中泰樂菌素殘留量的檢測方法，其特征在于土壤中泰樂菌素的殘留量為500～1000mg/kg。