[發明專利]一種粉葉金花組織培養快速繁殖方法

有效

• 申請號: 201711464315.1
• 申請日: 2017-12-28
• 公開（公告）號: CN108552055B
• 公開（公告）日: 2019-11-22
• 發明（設計）人: 黃永恒;陸利春;陳瑞鳳;賴鷺挺;賴春陽
• 申請（專利權）人: 廈門涌泉科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 35203 廈門市新華專利商標代理有限公司
• 代理人: 渠述華<國際申請>=<國際公布>=<進入

1.一種粉葉金花組織培養快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟A、不定芽誘導：采取健壯粉葉金花當年生帶有腋芽的莖段作為外植體，先對外植體進行清洗、消毒，接入不定芽誘導培養基中培養，光照強度1500-2000Lux，光照時間10h/d，溫度23±2℃，培養20-30天；

步驟B、增殖培養：將步驟A誘導出的不定芽切下后，接入增殖培養基中進增殖培養，培養條件為溫度為23±2℃，光照10h/d，培養周期35-40天；

步驟C、壯苗生根培養：將步驟B增殖后的芽體分株切下，然后接種于壯苗生根培養基中，培養周期60天；

其中，步驟A中外植體的清洗、消毒方法為：將采集的幼嫩枝條用家用清水清洗后用洗衣粉飽和澄清液浸泡12h，沖洗干凈后轉移至超凈工作臺中用75％的酒精溶液清洗10s，清洗過程中輕微搖晃使外植體充分與酒精溶液接觸，然后用無菌蒸餾水沖洗5遍，再用10％次氯酸鈉溶液清洗8min，無菌蒸餾水沖洗3遍，最后用0.1％升汞溶液再清洗8min，無菌蒸餾水沖洗5遍，瀝干水分備用；

步驟A中，所述不定芽誘導培養基中含改良后的MS基本培養基，植物激素6-BA0.8-1.0mg/L、NAA0.1-0.3mg/L、蔗糖30g/L，PH5.6-5.8；

步驟B中，所述增殖培養基中含有改良后的MS基本培養基，激素水平為6-BA 0.3-0.5mg/L、NAA 0.1-0.3mg/L、蔗糖20g/L，PH5.6-5.8；

步驟C中，壯苗生根培養基中含有改良后的MS基本培養基，激素水平ABT 0.1-0.3mg/L、香蕉50g/L、AG1g/L，PH5.6-5.8；

所述改良后的MS基本培養基包括：大量元素：硝酸銨1375mg/L、硝酸鉀1650mg/L、七水硫酸鎂370mg/L、磷酸二氫鉀170mg/L、氯化鈣170mg/L、四水硝酸鈣170mg/L；微量元素：碘化鉀0.83mg/L，硼酸0.62mg/L，硫酸錳22.3mg/L，硫酸鋅8.6mg/L，鉬酸鈉0.25mg/L，硫酸銅0.025mg/L，氯化鈷0.025mg/L；鐵鹽：乙二胺四乙酸二鈉37.3mg/L，硫酸亞鐵27.8mg/L；有機成分：肌醇100mg/L，甘氨酸2mg/L，鹽酸硫胺素1mg/L，鹽酸吡哆醇0.5mg/L，煙酸0.5mg/L，L-抗壞血酸25mg/L。