[發明專利]與新鐵炮百合光周期成花途徑相關的基因及其應用有效
| 申請號： | 201711463739.6 | 申請日： | 2017-12-28 |
| 公開（公告）號： | CN108265066B | 公開（公告）日： | 2020-12-01 |
| 發明（設計）人： | 賈桂霞;趙玉倩;閆笑;汪蓮娟;張倩;曹欽政 | 申請（專利權）人： | 北京林業大學 |
| 主分類號： | C12N15/29 | 分類號： | C12N15/29;C07K14/415;C12N15/11;C12N15/82;C12N5/10;C12N1/21;A01H5/02;A01H6/20;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京路浩知識產權代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君;王璐 |
| 地址： | 100083 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 新鐵炮 百合 光周期 途徑 相關 基因 及其 應用 | ||
1.與新鐵炮百合光周期成花途徑相關的基因，其特征在于，所述基因為LfCOL6，來自于新鐵炮百合，所述LfCOL6的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
2.由權利要求1所述基因轉錄得到的RNA。
3.由權利要求1所述基因編碼表達的蛋白質。
4.用于擴增權利要求1所述基因的引物。
5.含有權利要求1所述基因的載體。
6.根據權利要求5所述的載體，其特征在于，所述載體的構建方法包括如下步驟：
(1)提取新鐵炮百合葉片基因組RNA，反轉錄得cDNA，以所述cDNA為模板，利用權利要求4所述的引物，經PCR擴增獲得目的基因；
(2)將步驟(1)所得到的PCR產物，克隆至pLB載體，選取測序正確的菌株提取其質粒；
(3)以步驟(2)的質粒為模板，利用帶有NcoⅠ酶切位點的上游引物和帶有Bst EⅡ酶切位點的下游引物進行PCR擴增，得到帶有粘性末端的擴增片段；
(4)用Bst EⅡ-HF和NcoI-HF對pCAMBIA1301進行雙酶切，并回收酶切產物；
(5)采用In-Fusion酶將步驟(3)所得的帶有粘性末端的擴增片段與步驟(4)所得的酶切產物進行連接；
(6)將步驟(5)所得的連接產物轉化大腸桿菌DH5α感受態細胞，進行抗性篩選，并挑去陽性菌斑進行測序驗證，測序正確的菌株提取其質粒，即為含有目的基因為權利要求1所述基因的載體。
7.含有權利要求1所述基因的工程菌。
8.權利要求1所述的基因在促進新鐵炮百合開花中的應用。
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