[發(fā)明專利]一種拆分鹽酸西那卡塞對(duì)映異構(gòu)體的HPLC方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711461129.2
• 申請(qǐng)日: 2017-12-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108226337B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-09-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 何達(dá);陳巍;李鋒濤;孫健;岳永力;鐘靈玉;陳毓;馬甜
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇康思爾醫(yī)藥科技有限公司;江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
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本發(fā)明公開(kāi)了鹽酸西那卡塞對(duì)映異構(gòu)體的分離與分析測(cè)定方法，選用涂敷纖維素?三(4?甲基苯甲酸酯)的硅膠為手性固定相，以一定比例的正己烷?無(wú)水乙醇?乙醇胺混合溶劑為流動(dòng)相，用于分離和分析鹽酸西那卡塞的對(duì)映異構(gòu)體。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬涉及一種高效液相色譜法，尤其是一種拆分鹽酸西那卡塞對(duì)映異構(gòu)體的高效液相色譜法。

背景技術(shù)

鹽酸西那卡塞是第2代鈣受體調(diào)節(jié)劑，化學(xué)結(jié)構(gòu)中含有烷基苯胺骨架的新型化合物，可作用于G-蛋白共軛受體的鈣受體。甲狀旁腺細(xì)胞中，鈣離子受體對(duì)細(xì)胞外鈣離子(Ca²⁺)濃度較為敏感，調(diào)控甲狀旁腺激素(PTH)分泌。鹽酸西那卡塞與鈣離子受體結(jié)合，通過(guò)別構(gòu)效應(yīng)增強(qiáng)細(xì)胞外Ca²⁺的作用，激活鈣離子受體(鈣離子受體異構(gòu)激動(dòng)劑)。鹽酸西那卡塞還可以抑制PTH的分泌及甲狀旁腺細(xì)胞的增殖，經(jīng)口服給藥時(shí)可使血清PTH濃度降低[1]，用于治療因慢性腎臟疾病接受透析而引起繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥及甲狀旁腺腫瘤患者的高鈣血癥。

鹽酸西那卡塞分子中具有一個(gè)不對(duì)稱的手性碳原子，存在一對(duì)對(duì)映異構(gòu)體，是由兩種單一對(duì)映體R和S型對(duì)映體的組成外消旋混合物。其中S-鹽酸西那卡塞和R-鹽酸西那卡塞的結(jié)構(gòu)式如下：

R-鹽酸西那卡塞S-鹽酸西那卡塞

由于S構(gòu)型對(duì)映體沒(méi)有治療活性，臨床上使用的是其單一R構(gòu)型對(duì)映體，化學(xué)名為(R)-N-(1-(1-萘基)乙基)-3-(3-(三氟甲基)苯基)-1-丙胺鹽酸鹽。由于細(xì)胞表達(dá)的不同，使得鹽酸西那卡塞對(duì)映體在藥代動(dòng)力學(xué)方面存在著顯著差異。將二者進(jìn)行有效分離，成為鹽酸西那卡塞分離純化以及質(zhì)量控制中的難點(diǎn)。因此，建立一種好的拆分鹽酸西那卡塞對(duì)映異構(gòu)體的高效液相色譜方法，具有重要的應(yīng)用價(jià)值。一是為合成、分離純化R-鹽酸西那卡塞的工藝改進(jìn)提供依據(jù)；二是為控制R-鹽酸西那卡塞或制劑質(zhì)量提供依據(jù)；三是用于探討對(duì)映體在動(dòng)物或人體內(nèi)的轉(zhuǎn)化或代謝規(guī)律，為臨床合理用藥提供依據(jù)。

迄今為止，僅有少數(shù)文獻(xiàn)報(bào)道了該手性藥物的拆分，Vadde等(JChromatographia，2009，70:229-232)建立了西那卡塞消旋體的手性分析方法，但是其采用的流動(dòng)相為水及不能互溶的有機(jī)溶劑，其主要缺點(diǎn)是不能準(zhǔn)確控制流動(dòng)相的實(shí)際比例，從而導(dǎo)致保留時(shí)間的重現(xiàn)性較差。Ravi等(J Biomed Chromatogr，2011，25(6):674-679)利用Maefey試劑建立了西那卡塞對(duì)映體的間接反相高效液相色譜法和間接反相薄層色譜法，由于需要借助于微波衍生，故操作繁瑣，靈敏度不高。盧定強(qiáng)等(化學(xué)研究與應(yīng)用，2015，27(6)：882～885)建立了一種手性固定相拆分西那卡塞對(duì)映體的方法，在Chiralpak AD-H手性柱上，使用流動(dòng)相組成為流動(dòng)相為正己烷-異丙醇-三乙胺(90：10：0.1)進(jìn)行拆分，對(duì)映體保留時(shí)間在20min以內(nèi)，但峰型差、理論塔板數(shù)低。張峰等(華西藥學(xué)雜志，2014，29(1):075～076)在同樣色譜柱上，以正己烷－乙醇－乙醇胺(95∶5∶0.1)為流動(dòng)相，流速為1.0ml/min，分析鹽酸西那卡塞起始物料R－1－(1－萘基)乙胺中對(duì)映異構(gòu)體的含量，但用于分析鹽酸西那卡塞時(shí)，對(duì)映異構(gòu)體無(wú)法得到有效分離且對(duì)柱效產(chǎn)生影響。

總之，以上方法存在要么分析時(shí)間較長(zhǎng)，要么不能將鹽酸西那卡塞對(duì)映體實(shí)現(xiàn)基線分離，且均存在靈敏度不高、操作比較繁瑣或成本較高等問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了一種高效液相色譜法，可以將鹽酸西那卡塞對(duì)映異構(gòu)體進(jìn)行有效分離。本發(fā)明方法操作簡(jiǎn)便、成本低廉，能簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確地拆分鹽酸西那卡塞對(duì)映異構(gòu)體。

本發(fā)明的目的在于提供一種既簡(jiǎn)便又快速的拆分鹽酸西那卡塞對(duì)映異構(gòu)體的高效液相色譜方法，從而實(shí)現(xiàn)R-鹽酸西那卡塞與S-鹽酸西那卡塞的有效分離與準(zhǔn)確測(cè)定。