[發明專利]固定氨氧化細菌的玻璃板及其制備方法

在審

• 申請號: 201711461109.5
• 申請日: 2017-12-28
• 公開（公告）號: CN108164000A
• 公開（公告）日: 2018-06-15
• 發明（設計）人: 不公告發明人
• 申請（專利權）人: 光合強化（北京）生物科技有限公司
• 主分類號: C02F3/34
• 分類號: C02F3/34;C02F101/16
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種固定氨氧化細菌的玻璃板，其特征在于，制備該固定氨氧化細菌的玻璃板方法的具體步驟如下：

(1)將長度、寬度和厚度分別為10cm、5cm和0.5cm的玻璃板加入到250mL質量百分比濃度為45％的NaOH溶液中，在1000r/min條件下攪拌5分鐘，過濾除去液體，經800mL去離子水洗滌后在溫度為70℃的干燥箱中放置100分鐘，得到物質A1；將物質A1用200目的細砂紙打磨后得到物質A2；

(2)將8.19克酒石酸氫鉀在1000r/min攪拌條件下加入到500mL去離子水中，在1000r/min條件下攪拌3分鐘，然后加入3.3克叔丁醇鉀，搖勻后得到混合液K；

(3)將2.1克瓊脂糖和1.4克鄰苯二甲酸氫鉀加入到混合液K中，在1000r/min條件下攪拌3分鐘，得到混合液L；

(4)將物質A2加入到混合液L中，在溫度為40℃的搖床中搖動30分鐘，過濾除去液體得到物質A3，將物質A3在溫度為70℃的干燥箱中放置100分鐘，得到物質A；

(5)將1.2克2-氯-3-氰基吡嗪加入到750mL無水乙醇中，在1000r/min條件下攪拌3分鐘，搖勻后分成等量5份，得到混合液M1、混合液M2、混合液M3、混合液M4、混合液M5；

(6)將0.16克2-溴-5-硝基吡啶和0.22克4-溴四氫吡喃加入到250mL三氯甲烷中，在1000r/min條件下攪拌3分鐘，搖勻后分成等量5份，得到混合液N1、混合液N2、混合液N3、混合液N4、混合液N5；

(7)將混合液M1和0.28克四溴噻吩加入到混合液N1中，在1000r/min條件下攪拌3分鐘，得到混合液O1；

(8)將物質A加入到混合液O1中，在溫度為40℃的搖床中搖動30分鐘，過濾除去液體得到物質A1，將物質A1在溫度為70℃的干燥箱中放置100分鐘，得到物質A2；

(9)將混合液M2和0.25克四溴噻吩加入到混合液N2中，在1000r/min條件下攪拌3分鐘，得到混合液O2；

(10)將物質A2加入到混合液O2中，在溫度為40℃的搖床中搖動30分鐘，過濾除去液體得到物質A3，將物質A3在溫度為70℃的干燥箱中放置100分鐘，得到物質A4；

(11)將混合液M3和0.22克四溴噻吩加入到混合液N3中，在1000r/min條件下攪拌3分鐘，得到混合液O3；

(12)將物質A4加入到混合液O3中，在溫度為40℃的搖床中搖動30分鐘，過濾除去液體得到物質A5，將物質A5在溫度為70℃的干燥箱中放置100分鐘，得到物質A6；

(13)將混合液M4和0.19克四溴噻吩加入到混合液N4中，在1000r/min條件下攪拌3分鐘，得到混合液O4；

(14)將物質A6加入到混合液O4中，在溫度為40℃的搖床中搖動30分鐘，過濾除去液體得到物質A7，將物質A7在溫度為70℃的干燥箱中放置100分鐘，得到物質A8；

(15)將混合液M5和0.16克四溴噻吩加入到混合液N5中，在1000r/min條件下攪拌3分鐘，得到混合液O5；

(16)將物質A8加入到混合液O5中，在溫度為40℃的搖床中搖動30分鐘，過濾除去液體得到物質A9，將物質A9在溫度為70℃的干燥箱中放置100分鐘，得到物質B；

(17)將1.22克四氫噻喃-4-酮在1000r/min攪拌條件下加入到1500mL無水乙醇中，在1000r/min條件下攪拌3分鐘，搖勻后分成等量5份，得到混合液P1、混合液P2、混合液P3、混合液P4、混合液P5；

(18)將1.8克1-氨基蒽醌加入到混合液P1中，在1000r/min條件下攪拌3分鐘，得到混合液Q1；

(19)將物質B加入到混合液Q1中，在溫度為38℃的搖床中搖動25分鐘，過濾除去液體得到物質B1，將物質B1在溫度為70℃的干燥箱中放置100分鐘，得到物質B2；

(20)將2.1克1-氨基蒽醌加入到混合液P2中，在1000r/min條件下攪拌3分鐘，得到混合液Q2；

(21)將物質B2加入到混合液Q2中，在溫度為38℃的搖床中搖動25分鐘，過濾除去液體得到物質B3，將物質B3在溫度為70℃的干燥箱中放置100分鐘，得到物質B4；

(22)將2.4克1-氨基蒽醌加入到混合液P3中，在1000r/min條件下攪拌3分鐘，得到混合液Q3；

(23)將物質B4加入到混合液Q3中，在溫度為38℃的搖床中搖動25分鐘，過濾除去液體得到物質B5，將物質B5在溫度為70℃的干燥箱中放置100分鐘，得到物質B6；

(24)將2.7克1-氨基蒽醌加入到混合液P4中，在1000r/min條件下攪拌3分鐘，得到混合液Q4；

(25)將物質B6加入到混合液Q4中，在溫度為38℃的搖床中搖動25分鐘，過濾除去液體得到物質B7，將物質B7在溫度為70℃的干燥箱中放置100分鐘，得到物質B8；

(26)將3.0克1-氨基蒽醌加入到混合液P5中，在1000r/min條件下攪拌3分鐘，得到混合液Q5；

(27)將物質B8加入到混合液Q5中，在溫度為38℃的搖床中搖動25分鐘，過濾除去液體得到物質B9，將物質B9在溫度為70℃的干燥箱中放置100分鐘，得到物質C；

(28)將1.8克NH₄NO₃、10.2克NaCl、2.3克KH₂PO₄、0.5克FeCl₃、0.3克CoCl₂、0.2克ZnCl₂、3.3克MgSO₄、1.6克CaCl₂和0.1克NiCl₂加入到1000mL去離子水中，在1000r/min條件下攪拌5分鐘，得到混合液R；

(29)將10mL含菌量為5×10¹²CFU/mL的氨氧化細菌培養液加入到混合液R中，在1000r/min條件下攪拌3分鐘，得到混合液S；

(30)將物質C加入到混合液S中，在溫度為35℃的搖床中搖動24小時，過濾除去液體得到物質D；

(31)將物質D在溫度為25℃的培養箱中放置8小時，得到的物質即為固定氨氧化細菌的玻璃板。