[發(fā)明專利]一種蔥屬植物鱗莖組織培養(yǎng)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711457180.6
• 申請日: 2017-12-28
• 公開（公告）號: CN108029557B
• 公開（公告）日: 2019-03-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 楊平;張邊江;王立科;唐寧;陳全戰(zhàn)
• 申請（專利權(quán)）人: 南京曉莊學(xué)院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京三聚陽光知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11250
• 代理人: 閆聰彥

1.一種蔥屬植物鱗莖組織培養(yǎng)方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)選取蔥屬植物的地下鱗莖作為外植體，進行消毒處理；

(2)將消毒處理后的所述外植體接種于含有0.1-0.5mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸、0.1-1.0mg/L的噻苯隆和0.5-1.5mg/L的維生素B₆的MS培養(yǎng)基中，而后對所述外植體依次進行熱激處理、避光培養(yǎng)和光照培養(yǎng)；

(3)將步驟(2)得到的所述外植體移植到含有0.1-0.5mg/L的吲哚丁酸、0.1-1.0mg/L的噻苯隆和8-10mg/L的維生素B₁的White培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)；

其中，

所述步驟(2)中所述熱激處理的方法為，在30-40℃下避光培養(yǎng)3-5天；

所述步驟(2)中所述避光培養(yǎng)的方法為，在22-28℃下避光培養(yǎng)10-20天；

所述步驟(2)中所述光照培養(yǎng)的條件為，光照強度1000-1500Lx，光照時間14-20h/天，溫度22-28℃，培養(yǎng)時間10-20天；

所述步驟(3)中所述培養(yǎng)的條件為，光照強度1500-3000Lx，光照時間14-20h/天，溫度22-28℃；

所述MS培養(yǎng)基由如下制備方法制得：

配置MS大量元素母液，稱取76.0g的KNO₃、66.0g的NH₄NO₃、14.8g的MgSO₄·7H₂O、17.6g的CaCl₂·2H₂O、13.28g的無水CaCl₂，稱量完畢后，分別用蒸餾水溶解后混合，最后定容到1L；

配置MS微量元素母液，稱取2.23g的MnSO₄·H₂O、0.86g的ZnSO₄·7H₂O、0.62g的H₃BO₃、0.083g的KI、0.025g的Na₂MoO₄·2H₂O、0.0025g的CuSO₄·5H₂O、0.0025g的CoCl₂·6H₂O，稱量完畢后，分別用蒸餾水溶解后混合，最后定容到1L；

配置MS肌醇母液，稱取10.0g的肌醇、0.1g的煙酸，稱量完畢后，分別用蒸餾水溶解后混合，最后定容到1L；

配置MS鐵鹽母液，稱取2.78g的FeSO₄·7H₂O、3.73g的Na₂EDTA，稱量完畢后，分別用蒸餾水溶解后混合，最后定容到1L；

將MS微量元素母液、MS肌醇母液、MS鐵鹽母液分別稀釋100倍后與稀釋了40倍的MS大量元素母液按等比例混合，即得；

所述White培養(yǎng)基由如下制備方法制得：

配置White大量元素母液，稱量287mg的Ca(NO₃)₂·4H₂O、80mg的KNO₃、738mg的MgSO₄·7H₂O、453mg的Na₂SO₄·10H₂O、65mg的KCl、19.1mg的NaH₂PO₄·H₂O，稱量完畢后，分別用蒸餾水溶解后混合，最后定容到1L；

配置White微量元素母液，稱量6.6mg的MnSO₄·4H₂O、1.5mg的H₃BO₃、2.7mg的ZnSO₄·7H₂O、0.75mg的KI，稱量完畢后，分別用蒸餾水溶解后混合，最后定容到1L；

配置White有機物母液，稱量3.0mg的甘氨酸、0.5mg的煙酸、2.0mg的檸檬酸，稱量完畢后，分別用蒸餾水溶解后混合，最后定容到1L；

將White微量元素母液、White有機物母液分別稀釋100倍后與稀釋了40倍的White大量元素母液按等比例混合，即得。