[發明專利]一種體外蛋白合成體系、試劑盒及其制備方法

在審

• 申請號: 201711452033.X
• 申請日: 2017-12-28
• 公開（公告）號: CN109971783A
• 公開（公告）日: 2019-07-05
• 發明（設計）人: 郭敏;徐開;陳鑒冰;周子鑒;柴智;章小鈴;王海鵬;于雪
• 申請（專利權）人: 康碼（上海）生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/81
• 分類號: C12N15/81;C12N15/85
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種體外蛋白合成體系，其特征在于，包括：

(a) 細胞或細胞提取物、或其組合；

(b) 第一反應促進劑，所述第一反應促進劑選自下組：鋁、鋁鹽、氧鋁復合物、或其組合。

2.如權利要求1所述的蛋白合成體系，其特征在于，所述細胞選自下組：大腸桿菌、細菌、哺乳動物細胞(如HF9、Hela、CHO、HEK293)、植物細胞、酵母細胞、或其組合。

3.一種體外的無細胞的蛋白合成體系，其特征在于，包括：

(a) 細胞提取物；和

(b) 第一反應促進劑，所述第一反應促進劑選自下組：鋁、鋁鹽、氧鋁復合物、或其組合。

4.如權利要求1或3所述的蛋白合成體系，其特征在于，所述氧鋁復合物包括氧鋁納米顆粒。

5.如權利要求1或3所述的蛋白合成體系，其特征在于，所述氧鋁復合物包括Al₂O₃。

6.如權利要求1或3所述的蛋白合成體系，其特征在于，所述氧鋁復合物的粒徑為0.5-20 mm，較佳地，0.8-10 mm，更佳地，1-5 mm。

7.如權利要求1或3所述的蛋白合成體系，其特征在于，所述氧鋁復合物的平均重量為1-80 mg，較佳地，3-50 mg，更佳地，4-30 mg。

8.如權利要求1或3所述的蛋白合成體系，其特征在于，所述第一反應促進劑中，所述氧鋁復合物的含量（wt%）為0.1-20%，較佳地， 1-10%，更佳地，2%－8%，更佳地，4%－7%，更佳地，5.5%－6.5%，以所述第一反應促進劑的總重量計。

9.如權利要求1或3所述的蛋白合成體系，其特征在于，所述蛋白合成體系中，所述第一反應促進劑的含量（wt%）為20%－70%，較佳地，30%－60%，更佳地，45%－55%，以蛋白合成體系的總重量計。

10.一種權利要求1或權利要求3所述的蛋白合成體系的生產方法，其特征在于，包括步驟：

將組分(i)和組分(ii)混合，從而獲得權利要求1或權利要求3所述的蛋白合成體系，其中，所述組分(i)選自下組：細胞或細胞提取物、或其組合；所述組分(ii)為第一反應促進劑，所述第一反應促進劑選自下組：鋁、鋁鹽、氧鋁復合物、或其組合。

11.如權利要求10所述的生產方法，其特征在于，所述蛋白合成體系中，組分(i)與組分(ii)的質量比為0.1-10：0.1-10，較佳地，0.5-8:0.5-8，更佳地，0.8-5：0.8-5，更佳地，0.9-2：0.9-2。

12.一種體外蛋白合成的方法，其特征在于，包括：

(i) 提供權利要求1或權利要求3所述的蛋白合成體系，并加入外源的用于指導蛋白質合成的DNA分子；

(ii) 在適合的條件下，孵育步驟(i)的蛋白合成體系一段時間T1，從而合成由所述外源DNA編碼的蛋白質。

13.如權利要求12所述的方法，其特征在于，所述的方法還包括：(iii) 任選地從所述蛋白合成體系中，分離或檢測所述的由外源DNA編碼的蛋白質。

14.一種試劑盒，其特征在于，包括：

(k1) 第一容器，以及位于第一容器內的組分(i)，所述組分(i)選自下組：細胞或細胞提取物、或其組合；

(k2) 第二容器，以及位于第二容器內的組分(ii)，所述組分(ii)為第一反應促進劑，所述第一反應促進劑選自下組：鋁、鋁鹽、氧鋁復合物、或其組合；和

(kt) 標簽或說明書。