[發明專利]板栗抗癌活性多糖及其分離純化方法

在審

• 申請號: 201711426638.1
• 申請日: 2017-12-26
• 公開（公告）號: CN107880147A
• 公開（公告）日: 2018-04-06
• 發明（設計）人: 王同坤;楊越冬;梁雪;王曉紅;彭飛;解瑩;牛奎
• 申請（專利權）人: 河北科技師范學院
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙)11371
• 代理人: 覃蛟

技術領域

本發明涉及天然藥物領域，具體而言，涉及一種板栗抗癌活性多糖及其分離純化方法。

背景技術

板栗，是一種具有較高的食用及藥用價值的堅果類食品。板栗是民間常用的中草藥，它具有補腎強筋、養胃健脾、活血止血等功效，并且，可以治療腰腳軟弱、折傷腫痛、反胃、泄瀉、凜癰等常見癥狀。此外，最近幾年的研究表明，板栗還具多種生理功能，如：提高免疫力、抗凝血、抗疲勞、抗衰老、降血壓和降血糖等。

現代藥理研究表明，板栗多糖具有一定的還原能力，對脂質體氧化、Fenton反應產生的羥自由基和NO自由基均具有一定的消除或抑制作用，而且多糖濃度越高，其抗氧化活性越強。板栗多糖具有一定的清除羥基自由基、超氧陰離子自由基和過氧化氫的能力。目前，采用普通提取方法所得的板栗多糖，純度較低，功效欠佳，不利于進一步開發成產品。

發明內容

本發明的第一目的在于提供一種板栗抗癌活性多糖的分離純化方法，采用透析法和柱層析法相結合的方式，將板栗粗多糖中的小分子物質去除，所得到的產品中板栗多糖含量高。

本發明的第二目的在于提供一種由上述方法制備的板栗抗癌活性多糖，這種板栗多糖中活性成分的含量高，抗癌作用顯著。

為了實現本發明的上述目的，特采用以下技術方案：

一種板栗抗癌活性多糖的分離純化方法，其包括：

以溶劑提取法得到板栗粗多糖，將板栗粗多糖溶液轉移至透析袋中進行透析，得板栗多糖透析物；以及用柱層析法分離所述板栗多糖透析物，以去離子水為洗脫劑，洗脫劑流速為25～35mL/h。

一種由上述分離純化方法所制得的板栗抗癌活性多糖。

與現有技術相比，本發明的有益效果例如包括：

本發明提供的板栗多糖制備方法，通過透析法，去除分子量小于7000的小分子物質，使得板栗多糖的純度提高；再結合柱層析法，進一步去除板栗多糖透析物中的非多糖物質，使得最后所得產物中板栗多糖的純度得到進一步的提高。發明人研究發現，板栗多糖對多種癌癥的癌變細胞系均表現出較強的抑制活性，能夠有效抑制其相關癌變細胞的增殖。因此，本發明所制得的板栗多糖，抗癌作用顯著，可作為廣譜的抗癌活性物質，用來制備治療癌癥的藥物。

附圖說明

為了更清楚地說明本發明實施例或現有技術中的技術方案，以下將對實施例或現有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹。

圖1為實驗例2中Sevage法處理次數與多糖損失率、蛋白質去除率關系；

圖2為實驗例2中活性炭、雙氧水、大孔樹脂AB-8三種脫色方法的多糖損失率和脫色率的比較；

圖3為實驗例2中板栗多糖DEAE-52纖維素柱層析洗脫曲線。

具體實施方式

下面將結合實施例對本發明的實施方案進行詳細描述，但是本領域技術人員將會理解，下列實施例僅用于說明本發明，而不應視為限制本發明的范圍。實施例中未注明具體條件者，按照常規條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產廠商者，均為可以通過市售購買獲得的常規產品。

本實施方式提供一種板栗多糖的分離純化制備方法，其包括：

步驟S1:采用溶劑提取法制備板栗粗多糖。

較為優選的，將過40～60目篩的板栗粉末與提取溶劑混合，采用溶劑提取法進行提取，將所得的提取液進行濃縮、沉淀，制得板栗粗多糖。

其中，溶劑提取法包括：索氏提取法、熱水提取法、酸堿提取法、加壓溶劑萃取法、酶輔助提取法、微波提取法、超聲提取法、超臨界萃取法等。通過上述提取方法從板栗中提取得到板栗粗多糖溶液。

進一步的，當溶劑提取法為加壓溶劑萃取法時，其包括：將板栗粉末與硅藻土混合裝入萃取容器，以去離子水為萃取溶劑于溫度為50～80℃、壓力為3～9MPa下萃取4～12min，循環2～4次。

進一步的，當溶劑提取法為超聲波提取法時，其包括：將板栗粉末與水混合，在功率為500～1000W、溫度為20～50℃下超聲0.5～1h，循環1～3次。

進一步的，溶劑提取法為微波提取法，其包括：將所述板栗粉末與水混合，于微波容器內提取，提取功率500～1000W，提取0.5～1min后離心。

進一步的，溶劑提取法為浸提法，其包括：將所述板栗粉末與提取溶劑混合，于40～80℃下浸提，提取0.5～2h后離心。其中，提取溶劑為水、或者酸水，較為優選的，酸水為鹽酸水溶液，更進一步的，鹽酸水溶液的濃度為0.5-1mol/L。