[發明專利]氧化石墨烯聚乙二醇復合物的應用及聚合酶鏈式反應的方法

在審

• 申請號: 201711417496.2
• 申請日: 2017-12-25
• 公開（公告）號: CN108148898A
• 公開（公告）日: 2018-06-12
• 發明（設計）人: 鐘勇;吳雄清;余德鋒
• 申請（專利權）人: 信利光電股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/686
• 分類號: C12Q1/686
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 張雪嬌;趙青朵

本發明提供了一種氧化石墨烯聚乙二醇復合物在聚合酶鏈式反應中的應用。與現有技術相比，本發明在聚合酶鏈式反應中添加氧化石墨烯聚乙二醇復合物，在低濃度的氧化石墨烯聚乙二醇復合物的條件下，PCR各組分能夠被吸附在氧化石墨烯聚乙二醇復合物表面，使反應在其表面上進行，特異性明顯增強，不會有其他擴增產物產生。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，尤其涉及一種氧化石墨烯聚乙二醇復合物的應用及聚合酶鏈式反應的方法。

背景技術

自從聚合酶鏈式反應(PCR)問世以來，人們就不斷嘗試著通過添加外來物質對它進行優化改良。傳統添加劑改進PCR的空間越來越小，表現出難以克服的局限性。因此，人們試圖轉變觀念，從新興材料中尋求突破，尋找替代品。2012年，Sun課題組首次研究并報道了石墨烯能增強PCR的特異性：以pET-32a質粒為模板，比較了氧化石墨烯和還原石墨烯對PCR的影響，發現在一定濃度范圍內，均能增強PCR特異性，并表現出明顯的濃度依賴性和模板依賴性。

發明內容

有鑒于此，本發明要解決的技術問題在于提供一種氧化石墨烯聚乙二醇復合物的應用及聚合酶鏈式反應的方法。

本發明提供了一種氧化石墨烯聚乙二醇復合物在聚合酶鏈式反應中的應用。

本發明還提供了一種氧化石墨烯聚乙二醇復合物作為聚合酶鏈式反應特異性增強劑的應用。

優選的，所述聚合酶鏈式反應的體系中氧化石墨烯聚乙二醇復合物的濃度為0.8～11.2μg/ml。

本發明還提供了一種聚合酶鏈式反應的方法，包括：

S1)將聚合酶鏈式反應體系依次進行熱變性、退火與延伸，完成DNA的半保留復制；所述聚合酶鏈式反應體系中包括氧化石墨烯聚乙二醇復合物；

S2)反復重復熱變性、退火與延伸的步驟，完成聚合酶鏈式反應。

優選的，所述氧化石墨烯聚乙二醇復合物按照以下步驟制備：

S)將氧化石墨烯與氨基修飾的聚乙二醇混合反應，得到氧化石墨烯聚乙二醇復合物。

優選的，所述步驟S)具體為：

S1)將氧化石墨烯進行堿性處理，得到處理后的氧化石墨烯；S2)在羧基活化試劑存在的條件下，將處理后的氧化石墨烯與氨基修飾的聚乙二醇混合反應，得到氧化石墨烯聚乙二醇復合物。

優選的，所述步驟S2)具體為：

將處理后的氧化石墨烯與氨基修飾的聚乙二醇混合反應，然后加入部分羧基活化試劑超聲混合，再加入余下的羧基活化試劑攪拌，離心后，得到氧化石墨烯聚乙二醇復合物。

優選的，所述氧化石墨烯聚乙二醇復合物中聚乙二醇的聚合度為 200～4000。

優選的，所述氧化石墨烯聚乙二醇復合物中聚乙二醇的接枝率為 10％～40％。

本發明提供了一種氧化石墨烯聚乙二醇復合物在聚合酶鏈式反應中的應用。與現有技術相比，本發明在聚合酶鏈式反應中添加氧化石墨烯聚乙二醇復合物，在低濃度的氧化石墨烯聚乙二醇復合物的條件下，PCR各組分能夠被吸附在氧化石墨烯聚乙二醇復合物表面，使反應在其表面上進行，特異性明顯增強，不會有其他擴增產物產生。

附圖說明

圖1為本發明實施例中PCR產物的電泳圖。

具體實施方式

下面將結合本發明實施例，對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發明保護的范圍。