[發明專利]一種環孢素A眼凝膠的雜質控制方法

在審

• 申請號: 201711391728.1
• 申請日: 2017-12-21
• 公開（公告）號: CN108254457A
• 公開（公告）日: 2018-07-06
• 發明（設計）人: 李剛;曹開磊;李小羿;戴向榮;殷雷;凌娟
• 申請（專利權）人: 兆科藥業（廣州）有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京市躍揚知識產權代理事務所(普通合伙) 11559
• 代理人: 馮瓊

本發明提供了一種環孢素A眼凝膠的雜質控制方法，采用高效液相色譜進行測定，其中色譜條件如下：檢測波長為210?230nm；柱溫為60?68℃；流速為0.8?1ml/min；流動相A：THF?水?磷酸。本發明雜質控制方法能很好的同時解決輔料干擾問題和眾多雜質的分離問題，也為本類制劑雜質的質量標準制定提供了一個有效的方法。

技術領域

本發明涉及分析化學領域，特別涉及一種環孢素A眼凝膠的雜質控制方法。

背景技術

環孢素A(cyclosprine,CyA)是由11個氨基酸組成的環狀多肽,是土壤中一種真菌的活性代謝物。1978年英國首次將CyA應用于臨床腎移植,此后CyA又用于肝、心、肺、胰腺、骨髓等器官的移植,均取得令人滿意的效果,明顯提高病人的生存率。1984年環孢素A進入中國,形成了環孢素A+硫唑嘌呤+激素的三聯免疫抑制方案,大大提高了移植存活率,同時也使移植術后急性排斥反應的發生率大幅下降。CyA作為一種強效免疫抑制劑,近年來人們對它的研究越來越多,廣泛應用于各種疾病的治療。

環孢素具有難溶性，制成均一的凝膠或者液體制劑，需要將環孢素溶解，通常加入聚氧乙烯蓖麻油，蓖麻油或者吐溫等助溶劑，以保證環孢素溶解，且在儲存使用過程中不析出。但是增溶劑一般紫外出峰都很強烈，存在輔料干擾風險，且環孢素工藝雜質和降解雜質眾多。現有各種原料的雜質控制方法，無法有效的檢出這些雜質。

環孢素凝膠、環孢素眼用乳劑以及環孢素注射液都含有增溶劑,這些增溶劑大都有以下幾種：聚氧乙烯蓖麻油35、聚氧乙烯蓖麻油40，蓖麻油等；這類增溶劑紫外響應值很高，出風強烈，且極性和環孢素類似，因此這些輔料往往對環孢素雜質檢測影響很大。暫時還沒有關于控制環孢素制劑雜質的專利發表。文獻和各國藥典收錄的環孢素制劑，也沒有雜質控制項目和控制方法。

對于眼用制劑，國家要求按照注射劑管理，因此制劑的雜質控制十分嚴格。但是目前國內外專利和藥典法案，環孢素膠囊，環孢素注射液等都沒有對雜質提出控制方法和限度,因此給臨床應用帶來風險，也降低了產品的質量。如何解決檢測中輔料干擾問題和眾多雜質的分離控制成為急待解決的問題。

已經公布的控制環孢素雜質的方法，是中國藥典環孢素原料方法,分析方法為：

色譜柱：C₁₈色譜柱(150×4.6mm,5μm)

流動相：乙腈-水-叔丁基甲醚-磷酸(430:520:50:1)

流速：1.0ml/min

柱溫：70℃

波長：220nm

進樣量：80μl

上述方法的問題是：同時檢測多個雜質的專屬性不好，雜質與主峰分離度欠佳，個別雜質峰出峰過早，空白輔料干擾出峰早的雜質檢測。混標色譜圖如圖1。從圖1可看出，前面兩個雜質分離度很差，而且主峰后的雜質根本無法實現基線分離,無法同時對多個已知雜質進行控制。無法實現雜質與雜質、雜質與主峰的分離,且輔料峰干擾嚴重，影響了雜質的檢測。因此需建立一個新的有關物質方法，能夠檢測和分離以上6個已知雜質(環孢素B、環孢素C、環孢素D、環孢素H、異環孢素A、異環孢素H)和未知雜質。

發明內容

本發明的一個目的是提供一種環孢素A眼凝膠的雜質控制方法，用高效液相色譜進行測定，其中色譜條件如下：

檢測波長為210-230nm；

柱溫為60-68℃；

流速為0.8-1ml/min；

流動相：THF-水-磷酸。

作為優選，流動相THF-水-磷酸的體積比為400:600:1.5-2。

作為優選，所述柱溫為65℃。