[發明專利]一種用液相色譜法分離測定利伐沙班及其有關物質的方法

在審

• 申請號: 201711384892.X
• 申請日: 2017-12-20
• 公開（公告）號: CN108152412A
• 公開（公告）日: 2018-06-12
• 發明（設計）人: 魏巧;張慶霞;張華麗
• 申請（專利權）人: 樂普藥業股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 鄭州聯科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 時立新

1.一種用液相色譜法分離測定利伐沙班及其有關物質的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)樣品的制備：分別稱取利伐沙班對照品、乙酰草酰胺對照品、二-草酰胺-脲對照品、三胺對照品、脫氯化合物對照品、氧代鄰苯二甲酰亞胺對照品、4,5-二氯化合物對照品、二胺對照品、苯胺基嗎啉酮對照品、環氧代鄰苯二甲酰亞胺對照品、1,1’-羰基二咪唑對照品、5-氯噻吩-2-羧酸對照品、羥基氨基鄰苯二甲酰亞胺對照品、4-{4-[(5S)-5-(氨基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]苯基}嗎啉-3-酮鹽酸鹽對照品，將各對照品分別溶于混合溶劑中，得到對照品溶液，將對照品溶液混勻，得到樣品，每1L樣品中含每種對照品4～6μg；

所述混合溶劑由乙腈和無機溶劑按照體積比3:1～2混勻而成，所述無機溶劑為水、磷酸溶液或含有磷酸鹽及磷酸的水溶液；

(2)測定：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料的色譜柱，以流動相A及流動相B混合進行梯度洗脫，流動相流速為0.8～1.2mL/min，用紫外檢測器進行檢測，檢測波長為205～280nm，色譜柱柱溫箱溫度為30～50℃；

其中，流動相A由甲醇和含有緩沖鹽、離子對試劑及磷酸的水溶液混合而成，且流動相A中甲醇的體積分數為5～10％，含有緩沖鹽、離子對試劑及磷酸的水溶液中緩沖鹽的濃度為10～100mmol/L、離子對試劑的濃度為5～50mmol/L、H₃PO₄的濃度為2～6mmol/L；

流動相B為乙腈和水的混合液，且流動相B中乙腈的體積分數為90～95％。

2.根據權利要求1所述用液相色譜法分離測定利伐沙班及其有關物質的方法，其特征在于：步驟(1)中作為無機溶劑的磷酸溶液中H₃PO₄的濃度為0.008～0.015mol/L。

3.根據權利要求2所述用液相色譜法分離測定利伐沙班及其有關物質的方法，其特征在于，步驟(2)中所述梯度洗脫按照以下設置：

4.根據權利要求1所述用液相色譜法分離測定利伐沙班及其有關物質的方法，其特征在于：步驟(1)中所述含有磷酸鹽及磷酸的水溶液中，磷酸鹽的濃度為10～100mmol/L、H₃PO₄的濃度為2～6mmol/L。

5.根據權利要求4所述用液相色譜法分離測定利伐沙班及其有關物質的方法，其特征在于，步驟(2)中所述梯度洗脫按照以下設置：

6.根據權利要求1所述用液相色譜法分離測定利伐沙班及其有關物質的方法，其特征在于：步驟(2)中所述緩沖鹽為磷酸鹽、甲酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽及高氯酸鹽中的一種。

7.根據權利要求6所述用液相色譜法分離測定利伐沙班及其有關物質的方法，其特征在于：步驟(2)中所述緩沖鹽為磷酸二氫鉀。

8.根據權利要求1所述用液相色譜法分離測定利伐沙班及其有關物質的方法，其特征在于：步驟(2)中所述離子對試劑為己烷磺酸鈉、庚烷磺酸鈉、十二烷基磺酸鈉及十二烷基硫酸鈉的一種。

9.根據權利要求1所述用液相色譜法分離測定利伐沙班及其有關物質的方法，其特征在于：步驟(2)中流動相流速為1.0mL/min。

10.根據權利要求1所述用液相色譜法分離測定利伐沙班及其有關物質的方法，其特征在于：步驟(2)中所述紫外檢測器的檢測波長為250nm。