[發明專利]芋螺毒素多肽CTx-btg01及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201711384611.0
• 申請日: 2017-12-20
• 公開（公告）號: CN109942691A
• 公開（公告）日: 2019-06-28
• 發明（設計）人: 高炳淼;石瓊;彭超;張俊清;易云海;卞超
• 申請（專利權）人: 海南醫學院;深圳華大海洋科技有限公司;深圳市華大海洋研究院
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K1/14;C12N15/12;A01N37/46;A01P7/04
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 趙天月

1.一種芋螺毒素多肽，其特征在于，所述芋螺毒素多肽由17個氨基酸組成，所述芋螺毒素多肽的氨基酸全長序列為GGCCSHPACGVNHPELC；

任選地，所述芋螺毒素多肽從左邊數，第3個氨基酸和第9個氨基酸之間、第4個氨基酸和第17個氨基酸之間分別形成二硫鍵。

2.一種DNA序列，其特征在于，所述DNA序列編碼權利要求1所述的芋螺毒素多肽。

3.權利要求1所述的芋螺毒素多肽在藥物制備領域中的用途，所述藥物包括用于殺蟲的藥物；

任選地，所述藥物包括生物殺蟲劑；

任選地，所述藥物包括昆蟲殺蟲劑。

4.一種殺蟲藥物，其特征在于，所述殺蟲藥物以權利要求1所述的芋螺毒素多肽作為藥物活性中心，

所述殺蟲藥物還包括藥學上可用的賦形劑或者藥用輔料。

5.根據權利要求4所述的殺蟲藥物，其特征在于，所述殺蟲藥物的劑型包括選自粉劑、溶液劑、丸劑或膏劑中的至少一種；

任選地，所述殺蟲藥物制備成獨立的試劑單元，所述試劑單元的濃度至少為0.16nM。

6.一種藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物包括權利要求1所述的芋螺毒素多肽。

7.一種試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括權利要求1所述的芋螺毒素多肽；

任選地，所述試劑盒包括獨立的試劑單元，所述試劑單元包括所述芋螺毒素多肽，所述試劑單元中芋螺毒素多肽的濃度至少為0.16nM。

8.權利要求1所述的芋螺毒素多肽的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括：

芋螺毒素多肽的提取和富集；

芋螺毒素多肽的分離、質譜測序以及序列選??；

固相合成法合成多肽及合成多肽的復性。

9.根據權利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述芋螺毒素多肽的提取包括：

從桶形芋螺中取出毒管，置于多肽提取液中，混合離心分離，取上清液冷凍抽干，其中，所述多肽提取液包括20～40體積％乙腈和0.1～0.5體積％的三氟乙酸，以及蛋白酶抑制劑。

10.根據權利要求8或9所述的制備方法，其特征在于，所述芋螺毒素多肽的分離、質譜測序以及序列選取包括：將富集得到的芋螺毒素多肽采用強陽離子交換高效液相色譜進行分離，再采用高效液相色譜-質譜聯用儀進行多肽質譜檢測，根據質譜檢測產生的質譜數據進行數據解析和生物信息分析，得到芋螺毒素多肽完整的氨基酸序列；

任選地，所述固相合成法合成多肽及合成多肽的復性包括：化學合成方法合成其全序列，合成后多肽使用ESI-MS進行分子量確定，然后將合成的多肽進行復性，恢復天然起活性作用的結構，復性的多肽進行復性效率檢測，然后進一步純化復性后的多肽。