[發明專利]解淀粉芽孢桿菌Y-3生物保鮮劑的制備方法及其使用方法

在審

• 申請號: 201711384434.6
• 申請日: 2017-12-20
• 公開（公告）號: CN108077411A
• 公開（公告）日: 2018-05-29
• 發明（設計）人: 張立新;張曉宇;高振峰;趙佳;裴紅賓;趙迎麗;李娜;張新憲;張則君
• 申請（專利權）人: 山西省農業科學院農產品貯藏保鮮研究所
• 主分類號: A23B7/155
• 分類號: A23B7/155;C12N1/20;C12R1/07
• 代理公司: 北京世譽鑫誠專利代理事務所(普通合伙) 11368
• 代理人: 魏秀枝

1.一株解淀粉芽孢桿菌新菌株Y-3，于2017年5月11日在中國微生物菌種保藏管理委員會普通為生物中心進行專利保藏，登記入冊編號CGMCC NO為：14113；解淀粉芽孢桿菌Y-3在離體平板上對番茄灰霉病菌和番茄早疫病菌的抑菌效果可達97.47％和88.48％，其抑菌活性同目前報道的相關菌株相比具有明顯的活性優勢；在番茄活體上對番茄灰霉病菌和番茄早疫病菌的抑菌率達94.86％和64.01％，其中對采后番茄灰霉病原抑菌活性同離體相比下降不明顯，在番茄采后灰霉病害防治中優勢明顯。

2.一種解淀粉芽孢桿菌Y-3生物保鮮劑的制備方法，其特征在于：該制備方法的步驟是：

S1、從梓樹葉片分離出解淀粉芽孢桿菌Y-3，于-80℃的環境下保存；

S2、拮抗細菌活化：取-80℃保存的解淀粉芽孢桿菌Y-320μL采用涂布法涂布于新鮮NA平板，并于26℃恒溫活化培養24h后用于后續試驗；

S3、采用接種環取活化后的解淀粉芽孢桿菌Y-31環，接種至新鮮NB發酵液中，于160r/min、28℃發酵培養5d，使其抗逆性芽孢率達90％以上后終止發酵，用于可濕性粉劑制備；

S4、將膨潤土經粉碎機粉碎使其細度小于或等于44μm，裝于250mL磨口廣口瓶后于高溫高壓滅菌鍋滅菌30min，并置于50℃烘箱中烘干備用；

S5、將接種解淀粉芽孢桿菌Y-3培養的NB發酵液、膨潤土、PEG8000、凈洗劑、羧甲基纖維素鈉混合，經45℃真空干燥后，于粉碎機中粉碎使其細度小于或等于44μm，制得生物保鮮可濕性粉劑；接種解淀粉芽孢桿菌Y-3培養的NB發酵液、膨潤土、PEG8000、凈洗劑、羧甲基纖維素鈉的質量比為70：10：2.4：3.6：2。

3.根據權利要求2所述的解淀粉芽孢桿菌Y-3生物保鮮劑的制備方法，其特征在于：所述NA平板由牛肉浸膏、蛋白胨，氯化鈉、瓊脂與蒸餾水攪拌后制備而成，所述牛肉浸膏、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂、蒸餾水的質量比為3：10：5：18：1000，該NA平板的pH值為7.0。

4.根據權利要求3所述的解淀粉芽孢桿菌Y-3生物保鮮劑的制備方法，其特征在于：NB發酵液由牛肉浸膏、蛋白胨、氯化鈉、蒸餾水制備而成，所述牛肉浸膏、蛋白胨、氯化鈉、蒸餾水的質量比為3：10：5：1000，該NB發酵液的pH值為7.0。

5.一種如權利要求2至4所述制備方法所制得的解淀粉芽孢桿菌Y-3生物保鮮劑的使用方法，其特征在于：該使用方法的步驟是：

S6、將淀粉芽孢桿菌Y-3生物保鮮劑加水稀釋至300倍，

S7、在20℃自然貯藏條件下，采用噴霧或浸泡方式對采后的番茄進行處理。

6.根據權利要求5所述的解淀粉芽孢桿菌Y-3生物保鮮劑的的使用方法，其特征在于：所述浸泡時間為20min。