[發明專利]一種六勝肽的純化方法

在審

• 申請號: 201710005787.4
• 申請日: 2017-01-04
• 公開（公告）號: CN106632608A
• 公開（公告）日: 2017-05-10
• 發明（設計）人: 郭添;蘇晨燦;李乾;張忠旗;王惠嘉;王萬科;韓廣;王慧;高長波;趙金禮;楊小琳
• 申請（專利權）人: 陜西慧康生物科技有限責任公司
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/18;C07K1/20;C07K1/14
• 代理公司: 北京市浩天知識產權代理事務所(普通合伙)11276
• 代理人: 劉云貴,周華寧

1.一種六勝肽的純化方法，其特征在于，包括：

(1)溶解：將待純化的六勝肽粗品溶解在醋酸-醋酸鈉溶液中，過濾得到濾液；

(2)粗純：將步驟(1)得到的濾液上樣至強陽離子交換柱，用粗純流動相進行梯度洗脫，收集洗脫液；

(3)脫鹽：將步驟(2)收集的洗脫液上樣至反相聚合物柱，用脫鹽流動相進行梯度洗脫，收集六勝肽溶液，減壓濃縮與冷凍干燥得到六勝肽。

2.根據權利要求1所述的純化方法，其特征在于，步驟(1)中，待純化的六勝肽粗品與醋酸-醋酸鈉溶液的比率是(0.5g-100g):(20ml-1000ml)，優選地，待純化的六勝肽粗品與醋酸-醋酸鈉溶液的比率是(0.5g-10g):(20ml-100ml)。

3.根據權利要求1所述的純化方法，其特征在于，所述醋酸-醋酸鈉溶液是濃度為0.01-0.1mol/L、pH值為3.9-4.1的醋酸-醋酸鈉溶液。

4.根據權利要求1-3任一項所述的純化方法，其特征在于，所述粗純流動相由初始緩沖液流動相和洗脫緩沖液流動相組成，其中，所述初始緩沖液流動相是醋酸-醋酸鈉溶液，所述洗脫緩沖液流動相是加入氯化鈉的初始緩沖液流動相；優選地，所述初始緩沖液流動相是濃度為0.01-0.1mol/L、pH值為3.9-4.1的醋酸-醋酸鈉溶液，所述洗脫緩沖液流動相是加入0.5-1.5mol/L氯化鈉的初始緩沖液流動相。

5.根據權利要求1-3任一項所述的純化方法，其特征在于，所述脫鹽流動相由流動相A和流動相B組成，其中，所述流動相A是超純水，所述流動相B是色譜純甲醇。

6.根據權利要求4或5所述的純化方法，其特征在于，步驟(2)中，所述粗純流動相梯度是初始緩沖液流動相:洗脫緩沖液流動相由100:0到(80-60):(20-40)。

7.根據權利要求4或5所述的純化方法，其特征在于，步驟(3)中，所述脫鹽流動相梯度是流動相A:流動相B由(100-95):(0-5)到(90-80):(10-20)。

8.根據權利要求1-3任一項所述的純化方法，其特征在于，所述粗純流動相由初始緩沖液流動相和洗脫緩沖液流動相組成，其中，所述初始緩沖液流動相是醋酸-醋酸鈉溶液，所述洗脫緩沖液流動相是高濃度、高pH值的醋酸-醋酸鈉緩沖液；優選地，所述初始緩沖液流動相是濃度為0.01-0.1mol/L、pH值為3.9-4.1的醋酸-醋酸鈉溶液，所述洗脫緩沖液流動相由A相和B相組成，A相是濃度為0.01-0.1mol/L、pH值為5.5-6.2的醋酸-醋酸鈉溶液，B相是濃度為0.5-1.5mol/L、pH值為5.5-6.2的醋酸-醋酸鈉溶液。

9.根據權利要求1-3任一項所述的純化方法，其特征在于，所述脫鹽流動相由流動相A和流動相B組成，其中，所述流動相A是超純水，所述流動相B是色譜純甲醇。

10.根據權利要求8或9所述的純化方法，其特征在于，步驟(2)中，所述粗純流動相梯度是初始緩沖液流動相:洗脫緩沖液流動相由100:0到(80-60):(20-40)。

11.根據權利要求8或9所述的純化方法，其特征在于，步驟(3)中，所述脫鹽流動相梯度是流動相A:流動相B由(100-95):(0-5)到(90-80):(5-10)。