[發明專利]對多種高危型人乳頭瘤病毒實現分型的試劑盒

有效

• 申請號: 201711367631.7
• 申請日: 2017-12-18
• 公開（公告）號: CN107828920B
• 公開（公告）日: 2021-08-06
• 發明（設計）人: 鄭岷雪;馬勇;趙國棟
• 申請（專利權）人: 蘇州國科聞普生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理有限公司 11369
• 代理人: 韓飛

本案涉及一種對多種高危型人乳頭瘤病毒實現分型的試劑盒，包括有三個獨立分裝的試劑管；三種試劑管中具有分別對應HPV31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66和68的特異性探針SEQ ID NO.1?12；以及綜合對應該12個基因型的正向引物SEQ ID NO.13?20和反向引物SEQ ID NO.21?28。本發明通過對現有HPV分型試劑盒的改進，使得本申請的技術方案可以僅使用8個正向引物和8個反向引物就能夠分別在三管反應中實現高靈敏度、高特異性地對HPV16和18之外的12種高危型HPV進行分型。

技術領域

本發明涉及HPV分型試劑盒，特別涉及一種對多種高危型人乳頭瘤病毒實現分型的試劑盒，具體涉及一種對HPV31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66和68進行分型的試劑盒。

背景技術

人乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是一種嗜上皮性雙鏈DNA球形病毒，屬于乳頭瘤病毒科，主要感染皮膚和粘膜組織。HPV感染可引起疣、良性腫瘤和癌癥。目前已有證據顯示HPV感染可以導致包括宮頸癌、陰道癌、陰莖癌、肛門癌、口咽癌等多種癌癥。據國際人乳頭瘤病毒參考中心(International Human Papillomavirus Reference Center)的最新統計，目前共發現超過200種HPV基因型。然而并不是所有的HPV基因型均可以誘發癌癥。低危型HPV的感染可以誘發生長在生殖器官附近皮膚和粘膜上的人類尋常疣、尖銳濕疣以及生長在粘膜上的乳頭狀瘤等良性病變，只有為數不多的高危型HPV的感染可能致癌。目前了解最深入的HPV致癌的范例是女性宮頸癌。也正是因為在這方面的先驅性工作，德國科學家Harald zur Hausen于2008年獲得諾貝爾生理學和醫學獎。

宮頸癌是發生在女性子宮下段宮頸處的惡性腫瘤，是女性中第4位高發惡性腫瘤，占婦女癌癥死亡率的第4位。據國際衛生組織(WHO)的國際癌癥研究中心(IARC)報道，2012年全球宮頸癌新發病例為52.8萬例，約有26.6萬婦女死于宮頸癌。幾乎所有宮頸癌的發生都是高危型HPV的持續感染導致的，而且從最初感染到癌癥的發生需要經歷5到10年的時間。因此，利用以高危型HPV的遺傳物質DNA作為檢測對象的HPV分子診斷技術來進行宮頸癌早期篩查，可以提前發現病因，有效地對宮頸癌進行早期預防，從而降低發病率和死亡率。與醋酸目測檢查、巴氏涂片和液基細胞學等傳統宮頸癌篩查手段相比，HPV分子診斷具有靈敏度高且不依賴病理醫生的主觀判斷的優勢。因此，HPV分子診斷已經成為當前發達國家宮頸癌篩查的首選方法。

HPV分子診斷技術最大的一個挑戰是在保證檢測靈敏度的同時有效地將高危型HPV與低危型HPV區分開來，以避免因誤診而造成的過度診斷和過度治療以及由此對患者產生的不必要的精神壓力。如前所述，目前發現的HPV基因型已經超過200種，而根據WHO/IARC等權威機構的研究成果，其中只有14種基因型被定義為可以誘發宮頸癌的高危型，即HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66和68。此外，即使是14種高危型HPV中也并不是每一種基因型都具有相同的致癌能力。目前已有的流行病學數據顯示，HPV16和18是其中危害最大的兩個基因型，二者分別導致55％和15％的宮頸癌病例。其它高危型HPV導致了剩下約30％的宮頸癌病例，但這些基因型致癌能力之間的差異到底如何學術界還沒有明確的定論，特別是宮頸癌病例中不同高危型HPV的分布還存在明顯的地域性差異，如HPV52和58在亞洲相對更普遍，而HPV33在歐洲相對更普遍。