[發(fā)明專利]一株枯草芽孢桿菌及其在后發(fā)酵茶渥堆中降解赭曲霉A的應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711364882.X
• 申請(qǐng)日: 2017-12-18
• 公開（公告）號(hào): CN108102953A
• 公開（公告）日: 2018-06-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙振軍;張建;吳華偉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 長江大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A23F3/10;A23L5/20;C12R1/125
• 代理公司: 武漢智嘉聯(lián)合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 42231
• 代理人: 黃君軍

本發(fā)明提供了一株枯草芽孢桿菌，其保藏編號(hào)為CCTCC NO：M2017708；本發(fā)明還提供了該枯草芽孢桿菌在后發(fā)酵茶渥堆中降解赭曲霉毒素A的應(yīng)用；所述枯草芽孢桿菌能適應(yīng)后發(fā)酵茶渥堆環(huán)境(酸性、高溫、厭氧)且具有降解赭曲霉毒素A能力，且經(jīng)該保藏菌發(fā)酵降解赭曲霉毒素后，發(fā)酵茶樣主要品質(zhì)成分變化較小，利用該菌降解后發(fā)酵茶渥堆過程中產(chǎn)生的赭曲霉毒素A(OTA)，以保障后發(fā)酵茶的飲用安全。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及微生物學(xué)及生物降解領(lǐng)域，尤其涉及枯草芽孢桿菌及其在后發(fā)酵茶渥堆中降解赭曲霉毒素A的應(yīng)用。

背景技術(shù)

后發(fā)酵茶，又稱黑茶，包括普洱茶、青磚茶、茯磚茶和六堡茶等，主產(chǎn)自云南、湖北、湖南、廣西等省，是我國傳統(tǒng)的邊銷和僑銷茶類，是國內(nèi)西北、西南部邊疆等地少數(shù)民族和新、馬、港、澳甚至俄羅斯等地人民日常生活必不可少的飲料。渥堆是茯磚茶、普洱茶(熟茶)等后發(fā)酵茶風(fēng)味品質(zhì)形成的關(guān)鍵工序。渥堆過程自然接種的各種微生物在茶葉中大量生長繁殖，如曲霉屬、青霉屬真菌等具有代謝產(chǎn)生赭曲霉毒素A的能力。

赭曲霉毒素A(Ochratoxin A，OTA)是一種能對(duì)腎臟、肝臟和神經(jīng)系統(tǒng)造成損害的真菌毒素，1993年，國際癌癥研究機(jī)構(gòu)(IARC)將其定義為2B類致癌物。

OTA易在后發(fā)酵茶中存在，如2013年Haas etal.報(bào)導(dǎo)了的普洱茶中赭曲霉毒素A的含量在0.65-94.7μg/kg dw之間，檢測(cè)頻率為11.11％。赭曲霉毒素A等真菌毒素的存在給后發(fā)酵茶的飲用帶來巨大的安全風(fēng)險(xiǎn)，引起了社會(huì)的廣泛關(guān)注。

OTA的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，采用加熱、吸附等方法尚不能有效控制OTA的總量，雖然采用氧化、酸堿處理等方法可以有效降解轉(zhuǎn)化OTA，但對(duì)食品的營養(yǎng)成分和功能成分會(huì)帶來極大的破壞，因此目前唯有利用微生物本身或其代謝產(chǎn)物來降解OTA的生物脫毒法具有良好的應(yīng)用潛力。研究報(bào)道顯示，乳酸桿菌(Lactobacillus sp.)、黑曲霉(Aspergillus niger)、枯草桿菌(Bacillus subtilis) 等在葡萄酒等食品中OTA的降解效果顯著，但在后發(fā)酵茶中赭曲霉毒素A的生物降解研究至今未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，提供了一株枯草芽孢桿菌及其在后發(fā)酵茶渥堆中降解赭曲霉毒素A的應(yīng)用，該枯草芽孢桿菌適應(yīng)后發(fā)酵茶渥堆環(huán)境(酸性、高溫、厭氧)且具有降解赭曲霉毒素A能力，利用該菌降解后發(fā)酵茶渥堆過程中產(chǎn)生的赭曲霉毒素A(OTA)，以保障后發(fā)酵茶的飲用安全。

本發(fā)明的目的之一在于提供了一株枯草芽孢桿菌，本發(fā)明的枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)，菌代號(hào)為DTMo1，在后發(fā)酵茶渥堆過程中從渥堆茶樣中分離純化而來。

菌株DTMo1的微生物學(xué)特征如下：是芽孢桿菌屬的一種。單個(gè)細(xì)胞 0.4～0.5×0.4～0.8微米，著色均勻。無莢膜，周生鞭毛，能運(yùn)動(dòng)。革蘭氏陽性菌，無芽孢、異養(yǎng)、好氧，菌體呈短桿狀，菌落表面粗糙不透明，污白色或微黃色，在液體培養(yǎng)基中生長時(shí)，常形成皺醭。

表一

菌株DTMo1的理化特征如下：需氧菌，可利用蛋白質(zhì)、多種糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚。異養(yǎng)、好氧。葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、甘露醇發(fā)酵為陽性，乳糖發(fā)酵為陰性。