[發明專利]一種防治蔬菜南方根結線蟲病的微生物菌劑及其應用

在審

• 申請號: 201711355159.5
• 申請日: 2017-12-16
• 公開（公告）號: CN108251328A
• 公開（公告）日: 2018-07-06
• 發明（設計）人: 李紀順;王貽蓮;劉寶軍;扈進冬;魏艷麗;陳凱;楊合同
• 申請（專利權）人: 山東省科學院生態研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N11/14;A01N63/00;A01N63/02;A01P5/00;C12R1/01
• 代理公司: 濟南舜源專利事務所有限公司 37205
• 代理人: 于曉曉

1.一種防治蔬菜南方根結線蟲病的微生物菌劑，其特征在于，將越南伯克霍爾德氏菌(Burkholderia vietnamiensis)P418發酵液配合載體制備而成，所述的越南伯克霍爾德氏菌(Burkholderia vietnamiensis)P418在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，保藏日期是2004年8月30日，保藏編號：CGMCC No.1212。

2.根據權利要求1所述的一種防治蔬菜南方根結線蟲病的微生物菌劑，其特征在于，發酵液和載體的重量比為1:5-7，混合后的微生物菌劑中，有效活菌數達到10CFU/克以上，所述的載體為麥飯石，所述的麥飯石不大于80目。

3.根據權利要求1所述的一種防治蔬菜南方根結線蟲病的微生物菌劑，其特征在于，通過以下步驟制備：

(1)種子制備：將伯克氏菌(Burkholderia vietnamiensis)P418接入固氮培養基活化，挑取單菌落接入液態種子培養基，經28℃、200r/min培養24-36小時，OD值大于1.0即可作為菌種備用；所述的固氮培養基包括：磷酸氫二鉀0.5g，七水硫酸鎂0.2g，氯化鈉0.02g，氯化鈣0.2g，谷氨酸0.05g，乙二胺四乙酸鐵鈉鹽0.066g，葡萄糖5g，瓊脂10g，蒸餾水1000ml，pH7.2-7.4。

(2)發酵液制備：按照1％接種量接入滅菌的發酵培養基中，在28℃、150r/min-200r/min情況下培養36-48小時，發酵菌數達到100CFU/ml以上停止發酵；

(3)微生物菌劑制備：將發酵液和載體的比例按照1:5-7比例混合，使微生物菌劑的有效活菌數達到10CFU/克以上。

4.如權利要求1所述的微生物菌劑在防治蔬菜南方根結線蟲病中的應用。

5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，包括以下步驟：

①整地：按照每畝地使用200公斤優質有機肥撒入土壤中，旋耕整地；

②育苗：稱取微生物菌劑10-50克，稀釋50-100倍，將蔬菜種子浸入稀釋液內浸泡15分鐘，瀝干后播種，在育苗過程中可用稀釋50倍微生物菌劑液灌根一次；

③穴施：按照每畝施用微生物菌劑30公斤添加到高有機質(每畝50公斤)基質中，將其平均施入每棵蔬菜根穴內，注意穴施微生物菌劑要與土壤充分混合；

④灌根：在蔬菜生長期可按照每次10公斤的使用量間隔45天后使用一次，保證作物全生長期全程保護。

6.根據權利要求1所述的一種防治蔬菜南方根結線蟲病的微生物菌劑，其特征在于，該微生物菌劑中還含有豆粕。

7.根據權利要求6所述的一種防治蔬菜南方根結線蟲病的微生物菌劑，其特征在于，豆粕在微生物菌劑中的重量占比為50％。

8.根據權利要求6所述的一種防治蔬菜南方根結線蟲病的微生物菌劑，其特征在于，通過以下步驟制備：

(1)種子制備：將伯克氏菌(Burkholderia vietnamiensis)P418接入固氮培養基活化，挑取單菌落接入液態種子培養基，經28℃、200r/min培養24-36小時，OD值大于1.0即可作為菌種備用；所述的固氮培養基包括：磷酸氫二鉀0.5g，七水硫酸鎂0.2g，氯化鈉0.02g，氯化鈣0.2g，谷氨酸0.05g，乙二胺四乙酸鐵鈉鹽0.066g，葡萄糖5g，瓊脂10g，蒸餾水1000ml，pH7.2-7.4；

(2)發酵液制備：按照1％接種量接入滅菌的發酵培養基中，在28℃、150r/min-200r/min情況下培養36-48小時，發酵菌數達到100CFU/ml以上停止發酵得到液態發酵液；

(3)微生物菌劑制備：將液態發酵液和麥飯石按照重量比1：5-7比例混合，再按照1：1比列將豆粕與混合好的菌劑混合均勻后低溫50度以下吹干。

9.如權利要求6所述的微生物菌劑在防治蔬菜南方根結線蟲病中的應用。

10.根據權利要求9所述的應用，其特征在于，包括以下步驟：

①整地：按照每畝地使用200公斤優質有機肥撒入土壤中，旋耕整地；

②育苗：稱取液態發酵液10-50克，稀釋50-100倍，將蔬菜種子浸入稀釋液內浸泡15分鐘，瀝干后播種，在育苗過程中可用稀釋50倍液態發酵液灌根一次；

③穴施：按照每畝施用微生物菌劑30公斤平均施入每棵蔬菜根穴內，注意穴施微生物菌劑要與土壤充分混合；

④灌根：在蔬菜生長期可按照每次10公斤微生物菌劑的使用量間隔45天后使用一次，保證作物全生長期全程保護。