[發明專利]一種黃參粗多糖的脫蛋白方法

在審

• 申請號: 201711352286.X
• 申請日: 2017-12-15
• 公開（公告）號: CN109929045A
• 公開（公告）日: 2019-06-25
• 發明（設計）人: 于李佳
• 申請（專利權）人: 卓愛普科技（北京）有限公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61K31/715;A61P9/12;A61P3/06
• 代理公司: 北京愛普納杰專利代理事務所(特殊普通合伙) 11419
• 代理人: 王玉松

本發明提供了一種黃參粗多糖的脫蛋白方法。該方法包括以下步驟：1)提取黃參粗多糖提取液；2)黃參粗多糖脫蛋白：在步驟1)提取的黃參粗多糖濃縮液中加入酶解劑混合均勻，在轉速為400?500r/min、溫度為50?60℃的條件下攪拌20?30min，滅酶，離心，得A上清液和A沉淀，在A上清液中加入15?25mg/mL的磺胺二甲基嘧啶混合均勻，在常溫下反應3?5min，離心，得B上清液和B沉淀，在A沉淀中加入澄清劑，用NaOH和鹽酸調節pH至7?7.5，在50?70℃條件下攪拌1?1.5h，轉速為1000?2000r/min，離心，得C上清液和C沉淀，將B上清液和C上清液混合，即得黃參脫蛋白多糖溶液；本發明通過以上方法制備的黃參脫蛋白多糖，能夠顯著的提高黃參粗多糖脫蛋白的效果，降低黃參粗多糖的損失率。

技術領域

本發明涉及生物工程技術領域，特別涉及一種黃參粗多糖的脫蛋白方法。

背景技術

黃參為傘形科迷果芹屬迷果芹植物的根及根狀莖，廣泛分布于我國西北及東北等地的高寒陰濕處，它的肉質直根富含人體必需的16種氨基酸、礦物質和鈣、磷、鐵、鋅等微量元素，是一種經濟、藥用價值極高、純天然的綠色保健食品，對胃氣虛寒、神疲乏力、氣血失調、兒童發育遲緩、營養不良、挑食厭食等效果俱佳，被譽為小人參，黃參粗多糖中含有大量的雜質，如蛋白質、鞣質和淀粉等，在黃參粗多糖提取液中，蛋白質占了很大的比例，目前常用的黃參粗多糖除蛋白的方法主要有：sevag法、TCA-sevag法和鏈霉菌蛋白酶-sevag法，但使用這三種脫蛋白的方法去除黃參粗多糖中的蛋白時，往往會損失大量的多糖成分，同時，黃參粗多糖中的淀粉、無機鹽和鞣質等其他的雜質較難去除，導致黃參多糖的純度低，質量差，療效差，如何在黃參粗多糖中脫去大部分的蛋白質的同時降低黃參多糖的損失率，并去除黃參粗多糖中的其他雜質一直是黃參多糖分離純化的一個難題。

發明內容

為了解決現有技術中黃參脫蛋白效果差和黃參多糖損失率高等問題，本發明提供了一種黃參粗多糖的脫蛋白方法，采用該方法，可在高效率的脫去黃參多糖中的蛋白的同時，顯著的降低黃參多糖的損失率，還可以同時脫去黃參粗多糖中的無機鹽、淀粉和鞣質等雜質。

本發明提供了一種黃參粗多糖的脫蛋白方法，該方法包括以下步驟：

1)提取黃參粗多糖提取液；

2)黃參粗多糖脫蛋白：在步驟1)提取的黃參粗多糖濃縮液中加入酶解劑混合均勻，在轉速為400-500r/min、溫度為50-60℃的條件下攪拌20-30min，滅酶，離心，得A上清液和A沉淀，在A上清液中加入15-25mg/mL的磺胺二甲基嘧啶混合均勻，在常溫下反應3-5min，離心，得B上清液和B沉淀，在A沉淀中加入澄清劑，用NaOH和鹽酸調節pH至7-7.5，在50-70℃條件下攪拌1-1.5h，轉速為1000-2000r/min，離心，得C上清液和C沉淀，將B上清液和C上清液混合，即得黃參脫蛋白多糖溶液。

本發明通過步驟2)對黃參粗多糖進行脫蛋白處理，能夠高效的脫去黃參粗多糖中的蛋白質，同時降低黃參多糖的損失率。

進一步改進，步驟2)所述酶解劑由質量比為3:0.5-1.5的鏈霉菌蛋白酶和α淀粉酶混合構成的的混合酶，每毫升的黃參粗多糖濃縮液中添加5-10毫克的混合酶，所述澄清劑為ZTC-ⅡB型澄清劑，每毫克A沉淀中添加0.05-0.1毫升的ZTC-ⅡB型澄清劑。

進一步改進，步驟1)黃參粗多糖提取液的提取方法包括如下步驟：

S1：將黃參粉碎成粉末，過60目篩，按照40-50mL/g濃度加入蒸餾水，放置于勻漿機中攪拌均勻，得黃參勻漿；

S2：在S1所得的黃參勻漿中加入40-50倍量的蒸餾水微波提取30-40min，過濾，得濾渣和微波提取液；其中，微波功率為375-400W；