[發(fā)明專利]抗線蟲棉花轉(zhuǎn)化事件GHM3有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201711350465.X | 申請日： | 2017-12-15 |
| 公開（公告）號： | CN109929940B | 公開（公告）日： | 2022-09-09 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 王維鵬;杜雪瓊;何實;周正劍;楊曉鳳;陳凱;王緒霞;邱龍;馬崇烈;章旺根 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國種子集團(tuán)有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12N15/11;C12N15/84;A01H4/00;A01H6/60;A01H5/00 |
| 代理公司： | 北京英賽嘉華知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11204 | 代理人： | 王達(dá)佐;洪欣 |
| 地址： | 100045 北京市西*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 線蟲 棉花 轉(zhuǎn)化 事件 ghm3 | ||
本申請?zhí)峁┝丝咕€蟲棉花轉(zhuǎn)化事件GHM3，并提供了相關(guān)的創(chuàng)制方法、檢測方法和應(yīng)用，屬于植物生物技術(shù)領(lǐng)域。具體地，本申請以棉花品種材料YZ?1為受體經(jīng)過轉(zhuǎn)基因，得到在特定基因組序列之間插入外源基因插入物的棉花植株，其中外源基因插入物包含抗線蟲基因。本申請所獲得轉(zhuǎn)化事件GHM3，所插入的外源基因位于棉花基因組的非功能位點，不影響植物自身其他基因的表達(dá)，在使轉(zhuǎn)基因棉花植物獲得抗蟲特性的同時，保持了其良好的農(nóng)藝性狀。
技術(shù)領(lǐng)域
本申請涉及植物生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種抗線蟲棉花轉(zhuǎn)化事件的創(chuàng)制方法、檢測方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)
棉花作為一種特殊的經(jīng)濟(jì)作物，在種植過程中很容易受到外界因素的影響。除了溫度、濕度、施肥等因素的影響外，棉花種植過程中容易受到病蟲害的影響，如果不及時采取必要的病蟲害預(yù)防措施，將會影響棉花的整體產(chǎn)量，同時給棉花種植帶來不利影響。
棉花病害分為侵染性病害和非侵染性病害兩大類。其中侵染性病害是由病原生物，例如真菌、細(xì)菌、線蟲、病毒等引起的。雖然可以采用噴灑農(nóng)藥殺蟲劑的方法來預(yù)防棉花蟲害，但殺蟲劑殘留對于棉花產(chǎn)品的安全性存在一定的隱患，因而開發(fā)抗病蟲的棉花品種是從根部上防治蟲害爆發(fā)的根本。
轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以應(yīng)用于棉花品種的開發(fā)，使棉花具備抗蟲害體質(zhì)，是目前流行的防治蟲害的強(qiáng)有力手段。用于棉花的抗蟲基因主要是針對鱗翅目害蟲和同翅目昆蟲，如蘇云金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis，Bt)的內(nèi)毒素蛋白基因、豇豆胰蛋白酶抑制基因(Cowpea Trypsin Inhibitor，CpTI)和植物凝集素基因(1ectin)。對于土壤中危害棉花的線蟲，尚有待于開發(fā)有效的轉(zhuǎn)基因抗性品種。
發(fā)明內(nèi)容
一方面，本申請?zhí)峁┝撕怂岱肿?，其為：i)包含SEQ ID NO:1的第374-1036位核苷酸和/或第3657-4356位核苷酸所示序列，或其片段或其變體或其互補(bǔ)序列；ii)包含SEQ IDNO:1的第374-1036位核苷酸和第3335-3722位核苷酸所示序列，或其片段或其變體或其互補(bǔ)序列；iii)包含SEQ ID NO:1的第3335-3722位核苷酸和第3657-4356位核苷酸所示序列，或其片段或其變體或其互補(bǔ)序列；或者iv)包含SEQ ID NO:1的第374-1036位核苷酸，第3335-3722位核苷酸和第3657-4356位核苷酸所示序列，或其片段或其變體或其互補(bǔ)序列。
在一實施方案中，本申請?zhí)峁┑暮怂岱肿影琒EQ ID NO:1所示序列，或其片段或其變體或其互補(bǔ)序列。
在另一實施方案中，本申請?zhí)峁┑暮怂岱肿影磉_(dá)抗線蟲基因的表達(dá)盒，如SEQID NO:1的第2482-3991位核苷酸所示序列。
在又一實施方案中，本申請?zhí)峁┑暮怂岱肿?，其通過將如SEQ ID NO:1的第2482-3991位核苷酸所示的表達(dá)抗線蟲基因的表達(dá)盒導(dǎo)入棉花的基因組中獲得。
在另一實施方案中，本申請?zhí)峁┑暮怂岱肿哟嬖谟诿藁ㄖ参铩⒎N子、植物細(xì)胞、后代植物或植物部分中。
另一方面，本申請?zhí)峁┝擞糜跈z測棉花轉(zhuǎn)化事件的探針，其包含SEQ ID NO:1的第374-1036位核苷酸或第3657-4356位核苷酸所示序列，或其片段或其變體或其互補(bǔ)序列。
又一方面，本申請?zhí)峁┝擞糜跈z測棉花轉(zhuǎn)化事件的引物對，其能夠特異性擴(kuò)增產(chǎn)生包含SEQ ID NO:1的第374-1036位核苷酸或第3657-4356位核苷酸所示序列，或其片段或其變體或其互補(bǔ)序列。
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