[發(fā)明專利]西雙紫薇的組織培養(yǎng)方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201711348385.0
• 申請日: 2017-12-15
• 公開（公告）號: CN107980633A
• 公開（公告）日: 2018-05-04
• 發(fā)明（設計）人: 王國來
• 申請（專利權）人: 合肥欣和園苗木有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京聯(lián)瑞聯(lián)豐知識產權代理事務所(普通合伙)11411
• 代理人: 鄭自群

1.一種西雙紫薇的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)接種枝條的消毒滅菌：選取西雙紫薇當年生嫩枝條，進行消毒，消毒后的嫩枝接種至誘芽培養(yǎng)基上；

2)接種培養(yǎng)：將選取的外植體切成1～2厘米的小段接種在配置好的接種培養(yǎng)基上，培養(yǎng)25～30天；

3)繼代培養(yǎng)：把切下叢生芽接種繼代培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，在溫度23～27℃，光照強度2200～2800lux，每日光照10～12小時，至28～32天，小芽基部形成愈傷組織，并形成叢生芽，叢生小芽達到1～2cm；

4)生根培養(yǎng)：當小苗長至2～3㎝時，轉移到生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)，溫度控制在25～28℃，光照強度為1200～1500lux，每日光照10～12小時經20～25天；

5)煉苗和移栽：西雙紫薇組培苗煉苗，先在溫度20～25℃之間的溫室內擰松瓶蓋放置2～4天，然后進行溫床過渡移栽，過渡溫床建在普通單體的塑料大棚內，移栽的過程中盡量減少傷根，先噴灑多菌靈溶液，然后對根進行用營養(yǎng)液進行噴霧處理，控制溫度在20～30度，過渡移栽48～52天，上盆移栽；

其中，所述接種培養(yǎng)培養(yǎng)基的組分為：MS基本培養(yǎng)基+1.5mg/L 2,4—D+0.3mg/L NAA+32～38g/L蔗糖+6.5～7.5g/L瓊脂+3.2～3.6g/L碳粉；所述繼代培養(yǎng)基的組分為：MS基本培養(yǎng)基+0.5mg/L 2,4—D+0.4mg/L NAA+0.2mg/L 6—BA+32～38g/L蔗糖+6.5～7.5g/L瓊脂+3.2～3.6g/L碳粉+150～200g/L土豆。

2.根據(jù)權利要求1所述的西雙紫薇的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，所述生根培養(yǎng)基的組分為：1/3重量含量的MS基本培養(yǎng)基+0.8mg/LNAA+0.2mg/L IBA+0.25mg/L6—BA+0.3wt％活性炭+22～28g/L蔗糖。

3.根據(jù)權利要求2所述的西雙紫薇的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，所述接種培養(yǎng)基的pH值為5.4～5.6，所述繼代培養(yǎng)基的pH值為5.5～5.7，所述生根培養(yǎng)基的pH值為5.5～5.7。

4.根據(jù)權利要求1所述的西雙紫薇的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，所述營養(yǎng)液的組分為：0.1～0.12wt％NAA、0.15～0.2wt％多效唑、0.03～0.06wt％甘氨酸、0.2～0.3wt％維生素B及0.18～0.36wt％氯化膽堿，余量為水。

5.根據(jù)權利要求1所述的西雙紫薇的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，所述步驟1)西雙紫薇嫩枝條的消毒方法為：將嫩枝條用漂白粉浸泡5～10分鐘后，流水沖洗20～30分鐘，在超凈工作臺上以75％酒精浸泡2～3分鐘，取出后用預先準備好的無菌水沖洗4～5遍，瀝干水后即可。