[發明專利]一種柏子仁藥材UPLC特征圖譜的構建及其檢測方法

有效

• 申請號: 201711340900.0
• 申請日: 2017-12-14
• 公開（公告）號: CN108152399B
• 公開（公告）日: 2020-06-16
• 發明（設計）人: 朱德全;程松;劉桂聯;薛鵬輝;陳向東
• 申請（專利權）人: 廣東一方制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 廣州致信偉盛知識產權代理有限公司 44253
• 代理人: 彭玲

本發明公開了一種柏子仁藥材UPLC特征圖譜的構建及其檢測方法，本發明針對柏子仁藥材存在的質量控制問題，建立了柏子仁藥材的UPLC特征圖譜，同時采用UPLC?MS進行相關物質基礎研究的確認，標定了7個特征峰，采用本發明建立的柏子仁藥材的UPLC特征圖譜，可充分展示柏子仁藥材的化學成分的特征，特征峰信息量豐富，該方法重現性良好，準確可靠，通過所建立的UPLC特征圖譜可以實現對柏子仁藥材及相關偽品全面而有效的鑒別。

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，具體涉及一種柏子仁藥材特征圖譜的構建及其檢測方法。

背景技術

柏子仁為柏科植物側柏Platycladis orientalis(L.)Franco的干燥成熟種仁。味甘，平。具有養心安神，潤腸通便，止汗。柏子仁始載于《神農本草經》,列為上品,是臨床上常用中藥之一。它具有養心安神、止汗、潤腸的功能,用于治療虛煩失眠、心悸怔忡、陰虛盜汗、腸燥便秘等癥。

目前柏子仁貨源較為緊缺，一些不法商家將長糯米、秈米和柏子仁混合在一起，有些不法商人利用柏子仁較小、易碎的特點，把碎粳米和柏子仁混合一起炒，使粳米和柏子仁色澤一致，難以區分。有的在柏子仁中摻混入黃砂粒以增重，目前柏子仁摻偽的比例越來越大。

《中國藥典》2015年版柏子仁藥材只有顯微鑒別項，不能全面地評價質量。國內外參考文獻關于柏子仁的質量研究和鑒別均較少。目前還沒有文獻報道柏子仁指紋/特征圖譜技術研究，現有標準和方法不能對柏子仁藥材的質量進行有效的鑒別。

發明內容

為了克服上述現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種柏子仁藥材UPLC特征圖譜的構建方法，該方法重現性良好，準確可靠，通過所建立的UPLC特征圖譜可以實現對柏子仁藥材及相關偽品全面而有效的鑒別。

本發明是通過以下技術方案實現：

一種柏子仁藥材UPLC特征圖譜的構建方法，包括如下步驟：

(a)參照物溶液的制備：分別取色氨酸對照品和兒茶素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含10μg的溶液，即得；

(b)供試品溶液的制備：將本品粉末過二號篩，取1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50-70％甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理20-40分鐘，放冷，再稱定重量，用50-70％甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；

(c)色譜條件與系統適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相A，以0.1％磷酸為流動相B，按下表中的規定進行梯度洗脫；柱溫為30℃；流速為0.4ml/min；檢測波長為210nm；理論板數按色氨酸峰計算應不低于5000；

(d)對照特征圖譜的建立：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各1μl，注入超高效液相色譜儀，測定，采用“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統”，建立柏子仁藥材對照特征圖譜，確定具有7個特征峰，其中峰3為色氨酸、峰4為兒茶素；以峰3色氨酸峰為參照峰S峰，各特征峰的相對保留時間分別為：峰1為0.732、峰2為0.788、峰5為3.017、峰6為3.097、峰7為3.145，相對保留時間在規定值的±5％之內。

優選的，所述(b)中，供試品溶液的制備為：將本品粉末過二號篩，取1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70％甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用70％甲醇補足減失的重量，搖勻，0.22μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得。

優選的，所述(c)中選用Waters Cortecs T3色譜柱，柱長為100nm，內徑為2.1mm，粒徑為1.6μm。