[發(fā)明專利]一種乙醇耐受纖維素酶的連續(xù)發(fā)酵方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201711322662.0 | 申請日： | 2017-12-12 |
| 公開（公告）號： | CN107937370B | 公開（公告）日： | 2020-05-26 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 薛棟升;曾徐浩 | 申請（專利權(quán)）人： | 湖北工業(yè)大學(xué) |
| 主分類號： | C12N9/42 | 分類號： | C12N9/42;C12R1/685 |
| 代理公司： | 武漢科皓知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 彭勁松 |
| 地址： | 430068 湖北*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 乙醇 耐受 纖維素酶 連續(xù)發(fā)酵 方法 | ||
1.一種乙醇耐受纖維素內(nèi)切酶的連續(xù)發(fā)酵方法，其特征在于：包括如下步驟：
(1)黑曲霉(
(2)第一批次發(fā)酵：往發(fā)酵罐中加入培養(yǎng)基、初步活化的柱狀活性碳，將發(fā)酵罐的通氣量設(shè)為25-35L/min，25-28℃發(fā)酵1.5-3d；加入活性碳納米粉末和葡萄糖，25-28℃發(fā)酵1.5-3d；再次加入活性碳納米粉末，25-28℃發(fā)酵1-2d，發(fā)酵醪液放出發(fā)酵罐，用濾網(wǎng)過濾，濾液為第一批次發(fā)酵醪液，濾網(wǎng)上的為固定黑曲霉菌絲的柱狀活性碳；
(3)多批次發(fā)酵：往發(fā)酵罐中加入培養(yǎng)基、上批次所得固定黑曲霉菌絲的柱狀活性碳，將發(fā)酵罐的通氣量設(shè)為25-35L/min，25-28℃發(fā)酵1.5-3d；加入活性碳納米粉末和葡萄糖，25-28℃發(fā)酵1.5-3d；再次加入活性碳納米粉末，25-28℃發(fā)酵1-2d，發(fā)酵醪液放出發(fā)酵罐，用濾網(wǎng)過濾，濾液為第二批次發(fā)酵醪液，濾網(wǎng)上的為固定黑曲霉菌絲的柱狀活性碳；重復(fù)該步驟多次。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的連續(xù)發(fā)酵方法，其特征在于：步驟(1)中，每1.0kg柱狀活性碳噴灑150-250mL孢子液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的連續(xù)發(fā)酵方法，其特征在于：步驟(2)中，柱狀活性碳的用量為34-36g/L培養(yǎng)基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的連續(xù)發(fā)酵方法，其特征在于：每次活性碳納米粉末的加入量為0.2-2g/L培養(yǎng)基，葡萄糖的加入量為2-3g/L培養(yǎng)基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的連續(xù)發(fā)酵方法，其特征在于：進(jìn)行五批次發(fā)酵，發(fā)酵過程為：
第一批次發(fā)酵：往50L氣升式發(fā)酵罐中加入25L培養(yǎng)基和850g初步活化的柱狀活性碳，發(fā)酵罐的通氣量設(shè)為30L/min，28℃發(fā)酵2d；加入活性碳納米粉末50g、葡萄糖50g，補(bǔ)加發(fā)酵培養(yǎng)基至起始量，28℃發(fā)酵2d；再次加入活性碳納米粉末17g，補(bǔ)加發(fā)酵培養(yǎng)基至起始量，28℃發(fā)酵1d，發(fā)酵醪液放出發(fā)酵罐，用30目篩網(wǎng)過濾，濾液為第一批次發(fā)酵醪液，濾網(wǎng)上的為固定黑曲霉菌絲的柱狀活性碳；
第二批次發(fā)酵：往50L氣升式發(fā)酵罐中加入25L培養(yǎng)基，將上一批次所得固定黑曲霉菌絲的柱狀活性碳也全部加到氣升式發(fā)酵罐中，發(fā)酵罐的通氣量設(shè)為30L/min，28℃發(fā)酵2d；加入活性碳納米粉末5g，葡萄糖50g，補(bǔ)加發(fā)酵培養(yǎng)基至起始量，28℃發(fā)酵2d；再次加入活性碳納米粉末8g，補(bǔ)加發(fā)酵培養(yǎng)基至起始量，28℃發(fā)酵1d，發(fā)酵醪液放出發(fā)酵罐，用30目篩網(wǎng)過濾，濾液為第二批次發(fā)酵醪液，濾網(wǎng)上的為固定黑曲霉菌絲的活性碳柱；
第三批次發(fā)酵、第四批次發(fā)酵、第五批次發(fā)酵的操作均同第二批次。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的連續(xù)發(fā)酵方法，其特征在于：所述的培養(yǎng)基的配方為：麩皮30g/L，氯化銨5g/L，磷酸二氫鉀2g/L，玉米芯粉12g/L，蛋白胨0.01g/L。
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