[發明專利]一種禽腺病毒的抗原蛋白

在審

• 申請號: 201711314314.9
• 申請日: 2018-01-25
• 公開（公告）號: CN108059659A
• 公開（公告）日: 2018-05-22
• 發明（設計）人: 孫翠言;李軍;張穎;王海東
• 申請（專利權）人: 青島宏昊生物科技有限公司
• 主分類號: C07K14/075
• 分類號: C07K14/075;C12N15/34;A61K39/235;A61P31/20
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本發明提供一種禽腺病毒Hexon蛋白，其氨基酸序列為SEQ ID NO:2。本發明的Hexon蛋白可用于制備疫苗。本發明的Hexon蛋白制備的禽腺病毒亞單位疫苗具有抗原穩定性高，純度高，特異性強，不產生其他不相關抗體，檢測方法方便準確的特點，為工業化生產禽腺病毒亞單位疫苗奠定了堅實的基礎。

技術領域

本發明屬于疫苗制備技術領域，具體涉及一種禽腺病毒Hexon蛋白。

背景技術

禽腺病毒(Fowl Adenoviridae，FAV)是一種病原多樣的病原體，可引起人和動物等多種疾病。許多腺病毒可在健康禽體內復制，癥狀非常輕微或不表現感染癥狀，但有其它一些因素，特別是并發感染時，腺病毒可成為條件性病原，從而影響禽類宿主的健康。

禽腺病毒感染雞可呈明顯癥狀或不具有明顯癥狀。與該病毒有關的主要臨床和病理癥候群包括肝炎、再生障礙性貧血、出血、輕度呼吸道疾病和產蛋量減少。

研究表明禽腺病毒的病毒粒外形呈立體對稱的二十面體，直徑70～90納米，無包膜，外層由252個殼粒組成衣殼腺病毒結構(圖1)。其中240個殼粒是六鄰體(Hexon蛋白)，既具有共同的群特異性抗原，也具有型特異性抗原。另12個殼粒稱五鄰體，位于病毒粒的12個頂端，具有弱的群特異性抗原和一種使受感染細胞發生早期病變的毒性物質。

而Hexon蛋白是禽腺病毒主要結構蛋白，帶有主要的屬和亞屬特異性抗原決定簇和次要的種特異性抗原決定簇，與保護性免疫反應有關。禽腺病毒Hexon在病毒顆粒表面處于易接近的位置。己對Hexon蛋白的結構和功能進行了廣泛的研究。Hexon蛋白是大于900個殘基的復雜蛋白。三聚體的分子包括兩個非常保守的基座區P1和P2和四個高變環loop1、loop2、loop3、loop4。Loop1-Loop3所對應的氨基酸殘基存在7個獨特的超變區HVRs，這些HVRs在不同血清型之間的長度不同，變化范圍再2-38個氨基酸之間。這些HVRs會導致Hexon蛋白的抗原性發生或多或少的變異。

現有的禽腺病毒疫苗是使用完整的病原體作為制苗用抗原，但目前制造疫苗使用的毒株與臨床流行毒株的抗原性存在較大差異，從而影響了攻毒保護效果，制約滅活疫苗的應用。弱毒疫苗的另一個問題是可能出現毒力返強的問題，存在接種疫苗后發病的情況，生物安全不能完全保證。而且，I群禽腺病毒作為原發病原的作用尚不清楚。有跡象表明，不同血清型，甚至相同血清型的不同毒株，其致病力和感染力差異很大。當通過自然途徑或直接接觸感染時，很多分離物都不能引起臨床疾病的發生，僅以隱性感染的方式存在。但是雞群感染FAV-I后，能夠引起免疫抑制，造成機體對疫苗的免疫應答失敗，給肉雞養殖業帶來嚴重的危害。使用全病毒抗原制備的傳統疫苗免疫后產生的抗體，在臨床上無法區分野毒感染或是疫苗免疫產生，干擾疫情的監測。這是目前傳統疫苗存在的不足。為解決傳統疫苗的問題，就需要篩選新的毒株或者開發新的亞單位疫苗以克服現有疫苗的問題。

發明內容

本發明的目的是提供一種禽腺病毒的抗原蛋白，為禽腺病毒Hexon蛋白，該Hexon蛋白相比于已報到的Hexon蛋白具有蛋白序列上的差異，為一新型的禽腺病毒抗原蛋白，可用于制備基因工程亞單位疫苗。

本發明所提供一種禽腺病毒Hexon蛋白，包含有：

1)氨基酸序列為SEQ ID NO:1的蛋白，

2)在1)的蛋白上取代、缺失、添加一個或幾個氨基酸，且具有1)中蛋白功能的蛋白；

編碼上述禽腺病毒Hexon蛋白的基因，其一種核苷酸序列為SEQ ID NO:2；

本發明的Hexon蛋白可用于制備疫苗，優選為亞單位疫苗。

本發明篩選獲得了一個新型的Hexon蛋白，利用該Hexon蛋白制備的禽腺病毒亞單位疫苗具有抗原穩定性高，純度高，特異性強，對禽腺病毒具有顯著的免疫效果。

附圖說明