[發明專利]一種莫勒菌的原生質體制備方法有效
| 申請號： | 201711312365.8 | 申請日： | 2017-12-12 |
| 公開（公告）號： | CN107904178B | 公開（公告）日： | 2021-06-01 |
| 發明（設計）人： | 邱君志;睢珺文;薛青霖;牛亞靜;楊芳;謝勇嘯;陳宇熹;魏秀艷;涂新亞;姚靈丹 | 申請（專利權）人： | 福建農林大學 |
| 主分類號： | C12N1/14 | 分類號： | C12N1/14;C12R1/645 |
| 代理公司： | 福州元創專利商標代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡學俊 |
| 地址： | 350002 福*** | 國省代碼： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 莫勒菌 原生 質體 制備 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種莫勒菌原生質體制備的方法，其特征在于，包括以下步驟：
（1）接PDA菌體培養基上健壯莫勒菌菌絲體于PDB液體培養基中，在150rpm，28℃搖床培養54h,再將菌絲用四層無菌紗布過濾后，用無菌的研缽對菌絲進行研磨，將研磨好的菌絲放入PDB培養基中于100rpm，28℃搖床培養16h；
（2）再用四層無菌紗布過濾出菌絲，再用無菌藥匙將菌絲轉入無菌的三角瓶中，用10mL0.01%β-巰基乙醇處理菌絲體30分鐘，用pH6.0的磷酸鹽緩沖液配制0.7mol/L的NaCl溶液，并用此溶液配制24.2mg/mL真菌溶壁酶，在30℃酶解2.7h，用0.7mol/L NaCl溶液做滲透壓穩定劑，原生質體數量達到3.2×107個/mL,再生率達45%。
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