[發明專利]一種啶蟲脒的熒光檢測方法

有效

• 申請號: 201711305898.3
• 申請日: 2017-12-11
• 公開（公告）號: CN108120704B
• 公開（公告）日: 2020-10-02
• 發明（設計）人: 焦哲;梁洪澳;盧曉霞;陳洪偉;范洪波
• 申請（專利權）人: 東莞理工學院
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N21/31;C01B32/15;C09K11/65;B82Y20/00
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 陳衛

本發明涉及一種啶蟲脒的熒光檢測方法，所述方法包括如下步驟：S1：對碳量子點進行活化，然后將碳量子點平均分成兩份，其中一份加入對啶蟲脒有特異識別作用的核酸適配體溶液，另一份加入核酸適配體互補鏈溶液，經振蕩偶聯后，將兩份溶液混合得碳量子點混合液；S2：用電泳方法將S1所得碳量子點混合液中剩余的核酸適配體及其互補鏈分離，得到只含適配體及互補鏈修飾的碳量子點溶液；S3：將待測啶蟲脒樣品加入至S1所述碳量子點混合液中，震蕩使反應，然后用分子熒光光度計測量溶液的熒光強度。本發明通過將對啶蟲脒有特異識別作用的核酸適配體及其互補鏈修飾到碳量子點上，利用啶蟲脒加入前后碳量子點熒光強度的改變，建立了一種啶蟲脒的快速、靈敏的檢測方法。

技術領域

本發明涉及分析化學檢測技術領域，具體地，涉及一種啶蟲脒的熒光檢測方法。

背景技術

碳量子點是一種新型的納米材料，具有吸收光譜寬、發射光譜窄且對稱、發射波長可控、不易發生光漂白、量子產率高、斯托克斯位移大等優點，是一種非常理想的熒光材料。基于其優良的光電特性，碳量子點在眾多領域中得到了深入的研究和應用，如生物領域（細胞成像以及動物活體成像）、分析領域（檢測金屬和非金屬離子、小分子化合物等）、能源領域（碳量子點敏化太陽能電池等）和光電器件等等。

啶蟲脒屬氯化煙堿類化合物，是一種新型殺蟲劑。文獻報道的關于蔬菜、茶葉等樣品中的啶蟲脒分析方法主要是通過液液萃取、固相萃取和固相微萃取等樣品前處理方法對目標分析物進行分離富集，洗脫后利用高靈敏度的液相色譜-質譜（HPLC-MS），氣相色譜-質譜（GC-MS）等儀器進行定性和定量分析。這些分析方法結合了色譜的強大的分離能力和質譜的高靈敏的定量能力，可以實現對目標物檢測。但存在操作步驟繁瑣，選擇性不高，分析周期長等缺點。

因此，亟需建立一種選擇性強、靈敏度高，同時又能實現富集和檢測為一體的快速高效的分析方法。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供一種啶蟲脒的熒光檢測方法。

本發明通過將對啶蟲脒有特異識別作用的核酸適配體互補鏈修飾到碳量子點上，利用啶蟲脒加入前后碳量子點熒光強度的改變，建立了一種啶蟲脒的快速、靈敏的檢測方法。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

一種啶蟲脒的熒光檢測方法，所述方法包括如下步驟：

S1：對碳量子點進行活化，然后將碳量子點平均分成兩份，其中一份加入對啶蟲脒有特異識別作用的核酸適配體溶液，另一份加入核酸適配體互補鏈溶液，經振蕩偶聯后，將兩份溶液混合得碳量子點混合液；

S2：用電泳方法將S1所得碳量子點混合液中剩余的核酸適配體及其互補鏈分離，得到只含適配體及互補鏈修飾的碳量子點溶液；

S3：將待測啶蟲脒樣品加入至S1所述碳量子點混合液中，震蕩使反應，然后用分子熒光光度計測量溶液的熒光強度。

本發明提供的檢測方法通過將核酸適配體和互補鏈分別修飾到碳量子點上，在沒有與啶蟲脒混合的時候，核酸適配體和互補鏈結合導致碳量子點團聚熒光淬滅；當將碳量子點溶液和啶蟲脒混合時，修飾了核酸適配體的碳量子點與啶蟲脒結合，進而碳量子點不再團聚，熒光恢復；利用這個原理實現對啶蟲脒的檢測。

優選地，S1中，所述碳量子點混合液的質量濃度為1.0～8.0*10^-4mg/mL；更為優選地，所述碳量子點混合液的質量濃度為1.6*10^-4mg/mL。

優選地，S1中，所述核酸適配體溶液的濃度為0.1～3nmol/L；更為優選地，所述核酸適配體溶液的濃度為1.92nmol/L。

優選地，S3中，反應溫度為21～37℃，反應時間為5～120min；更為優選地，反應溫度為21℃，反應時間為30min。